[发明专利]定量LIF的方法及其用途

说明书

本文描述了用于定量来自生物学样品的总LIF的测定。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年6月18日提交的欧洲申请序列号18382433.3的权益，其内容通过引用以其整体特此并入。

背景技术

白血病抑制因子(LIF)是白细胞介素6(IL6)细胞因子家族的成员。根据LIF的已知生理学活性、LIF缺乏的临床特征以及健康组织和肿瘤中LIF表达的非临床研究，预期在一系列实体瘤中对LIF的抑制是很好耐受的并产生抗肿瘤功效，这些实体瘤包括但不限于非小细胞肺癌(NSCLC)、胰腺癌、卵巢癌和多形性胶质母细胞瘤(GBM)。

LIF通过与LIFR结合、然后募集gp130以形成能够启动细胞内JAK-STAT激活的三元复合物而发出信号。因此，LIF对LIFR和gp130都有结合位点，为抑制LIF信号传导提供了多种选择。一种策略是直接阻断LIF细胞因子与LIFR的结合。替代性地，抑制LIF信号传导的另一种策略是阻断LIF与gp130的结合。在这种情况下，结合与LIF的gp130结合位点重叠的表位的mAb通过抑制gp130向LIF/LIFR复合物的募集(这对于信号转导是必需的)来阻止下游信号传导。

正常健康个体中LIF的典型血浆或血清浓度为0-10pg/ml之间。但是，由于抗体/配体复合物的清除比游离配体的清除慢，因此一旦细胞因子与抗体结合，血浆中总LIF的水平可能会增加。参见例如，Chakraborty A，Tannenbaum S，Rordorf C等人(2012)“Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Properties of Canakinumab，a Human Anti-Interleukin-1βMonoclonal Antibody[人抗白细胞介素1β单克隆抗体卡那单抗的药代动力学和药效学特性]”Clin Pharmacokinet[临床药代动力学].51：e1-e18；Dudai S，Subramanian K，Flandre T等人(2015)“Integrated pharmacokinetic，pharmacodynamicsand immunogenicity profiling of an anti-CCL21monoclonal antibody incynomolgus monkeys[食蟹猴中抗CCL21单克隆抗体的整合药代动力学、药效学和免疫原性分析]”mAbs[单克隆抗体].7：829-837。因此，可以将药物-配体复合物或总配体的积累以及饱和的持续时间并入PK-PD模型中，以预测靶标接合以及在外围中的功效。

发明内容

本披露涉及抗白血病抑制因子(LIF)抗体的在施用于LIF的gp130结合位点处或附近结合的治疗性抗体后用于检测患者样品(如血液、血浆或血清)中总LIF水平的用途。在使用本文所述的夹心方法的酶联免疫吸附测定(ELISA)中，LIF可以通过将其夹在固定的捕获抗体和与可检测标记物质缀合的另一种抗体(检测抗体)之间来定量检测，其中这些抗体结合至LIF的非重叠表位。在本披露中，LIF的捕获和检测抗体表位另外都不与治疗性mAbh5D8的结合位点重叠。因此，已经鉴定出LIF的三个不同的非重叠表位，使得三种抗体(捕获、检测和治疗性抗体)可以同时结合LIF。这种形式的优点在于，无论是否被该治疗性抗体结合，都可以检测LIF，从而定量样品中存在的“总LIF”(结合的和未结合的)。该测定能够准确测量20pg/ml(1pM)和2ng/ml(100pM)之间的总LIF水平，但不限于此。总LIF水平可以作为重要的治疗指标，并允许临床医生密切监测个体中LIF治疗性抗体的PK/PD动态。