[发明专利]原位基因编辑

权利要求书

1.一种用于在体内修饰受试者中的靶向细胞群的基因组的方法，所述方法包括

a.使所述受试者与病毒接触，其中所述病毒将编码靶向序列的核酸酶的核酸序列转导至所述靶向细胞群中；以及

b.用所述靶向序列的核酸酶修饰所述靶向细胞群的所述基因组，

其中所述靶向细胞群不是造血干细胞或造血祖细胞。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述病毒是腺相关病毒(AAV)。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述AAV对于所述靶向细胞群具有趋向性。

4.如权利要求2至3所述的方法，其中所述AAV对于非靶向细胞群具有减少的趋向性或没有趋向性。

5.如权利要求2至4所述的方法，其中AAV是AAV血清型1、2、6、8、9、10或Anc80L65。

6.如权利要求1至5所述的方法，其中静脉内施用所述病毒或将所述病毒局部注射到包含所述靶向细胞群的组织中。

7.如权利要求1至6所述的方法，其中所述靶向序列的核酸酶是锌指核酸酶(ZFN)、转录激活因子样效应核酸酶(TALEN)、Cre重组酶或RNA指导的核酸酶。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述RNA指导的核酸酶是Cas9核酸酶。

9.如权利要求1至8所述的方法，其中所述病毒在所述细胞群中进一步转导编码一个或多个gRNA的核酸序列。

10.如权利要求1至9所述的方法，所述方法还包括使所述受试者与第二病毒接触，所述第二病毒在所述靶向细胞群中转导编码一个或多个gRNA的核酸序列。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述第二病毒是AAV。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述AAV对于所述靶向细胞群具有趋向性。

13.如权利要求11至12所述的方法，其中所述AAV对于非靶向细胞群具有减少的趋向性或没有趋向性。

14.如权利要求11至13所述的方法，其中所述AAV是AAV血清型1、2、6、8、9、10或Anc80L65。

15.如权利要求1至14所述的方法，其中所述靶向细胞群是干细胞或祖细胞。

16.如权利要求1至15所述的方法，其中所述靶向细胞群是组织干细胞。

17.如权利要求1至16所述的方法，其中所述靶向细胞群是功能性肌肉干细胞。

18.如权利要求1至16所述的方法，其中所述靶向细胞群是骨骼肌中的间充质祖细胞(Sca-1⁺)。

19.如权利要求1至16所述的方法，其中所述靶向细胞群是皮肤组织中的真皮间充质细胞(CD140a⁺)。

20.如权利要求1至16所述的方法，其中所述靶向细胞群是选自普通髓系祖细胞群、粒细胞单核细胞祖细胞群、巨核细胞红细胞祖细胞群、多能祖细胞群和谱系定型红细胞前体细胞群的祖细胞群。

21.如权利要求1至20所述的方法，其中所述修饰包括引入或校正突变。

22.如权利要求1至20所述的方法，其中所述修饰包括通过同源定向修复校正突变。