[发明专利]军团菌无炭培养基

权利要求书

1.一种体外培养军团菌的方法，包括将军团菌在无炭固体琼脂培养基上孵育，所述培养基包含：

a)血清，其中血清的浓度为1％-35％(v/v)；

b)氮源；和

c)铁源。

2.无炭固体琼脂培养基在军团菌培养中的用途，其中，无炭固体琼脂培养基包含：

a)血清，其中血清的浓度为1％-35％(v/v)；

b)氮源；和

c)铁源。

3.鉴定适合抑制军团菌生长的抗生素的筛选方法，包括：

a)使军团菌属细菌与无炭固体琼脂培养基接触以提供测试样品，其中无炭固体琼脂培养基包含：

i.血清，其中血清的浓度为1％-35％(v/v)；

ii.氮源；和

iii.铁源；

b)在候选抗生素存在下孵育测试样品；和

c)当孵育后测试样品中所述军团菌的细菌接种量低于对照样品中军团菌的细菌接种量时，将所述候选抗生素鉴定为适合抑制军团菌的生长，其中所述对照样品在无所述候选抗生素存在下孵育；或者

d)当孵育后测试样品中所述军团菌的细菌接种量等于或大于对照样品中军团菌的细菌接种量时，将所述候选抗生素鉴定为不适合抑制军团菌的生长，其中所述对照样品在无所述候选抗生素存在下孵育。

4.试剂盒，其包含用于培养军团菌的无炭固体琼脂培养基和/或用于制备用于培养军团菌的无炭固体琼脂培养基的试剂，其中：

a)所述无炭固体琼脂培养基包含：

i.血清，其中血清的浓度为1％-35％(v/v)；

ii.氮源；和

iii.铁源；和/或

b)所述试剂包含：

i.琼脂

ii.血清；

iii.氮源；和

iv.铁源；和

其中所述试剂盒进一步包含在所述无炭固体琼脂培养基上培养军团菌细菌的说明书。

5.根据权利要求4所述的试剂盒用于培养军团菌的用途。

6.根据权利要求3所述的方法，其中，所述方法还包括将步骤(c)和/或步骤(d)中获得的数据记录在合适的数据载体上的步骤。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法、用途或试剂盒，其中所述氮源选自酵母提取物、牛肉提取物、肝脏提取物、酪蛋白水解产物、植物细胞提取物、大豆提取物或其任何组合中的一种或多种；优选地，其中所述氨基酸源是酵母提取物。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法、用途或试剂盒，其中所述铁源是螯合铁和/或焦磷酸铁。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法、用途或试剂盒，其中：

a)琼脂的浓度为0.2％-5％(w/v)；

b)氮源的浓度为0.2％-10％(w/v)；和/或

c)铁源的浓度为0.01％-0.1％(w/v)。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法、用途或试剂盒，其中所述无炭固体琼脂培养基还包含一种或多种选自以下的试剂：

a)缓冲剂，优选其中所述缓冲剂选自N-(2-乙酰胺基)-2-氨基乙烷磺酸(ACES)缓冲剂、氢氧化钾或其组合；

b)α-酮戊二酸；和/或

c)半胱氨酸。

11.根据权利要求10所述的方法、试剂盒或用途，其中：

a)缓冲液的浓度为1mM-500mM；

b)α-酮戊二酸的浓度为0.001％-1％(w/v)；和/或

c)半胱氨酸的浓度为1％-10％(w/v)。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法、用途或试剂盒，其中所述血清是选自马血清、绵羊血清、山羊血清、牛血清、胎牛血清、小牛血清、小鼠血清、大鼠血清、猪血清、豚鼠血清、猪血清和兔血清中的一种或多种。