[发明专利]表达CAR的T细胞和CAR表达载体

说明书

本发明提供与单独表达CAR的(不表达细胞因子和/或趋化因子的)免疫细胞(CAR‑T细胞等)相比抗肿瘤活性更高的免疫细胞(CAR‑T细胞等)。本发明的一个方面所提供的T细胞表达(1)嵌合抗原受体(CAR)、(2)选自由白细胞介素‑15(IL‑15)、白细胞介素‑18(IL‑18)、白细胞介素‑21(IL‑21)和白细胞介素‑27(IL‑27)组成的组中的至少一种、以及(3)CC趋化因子配体19(CCL19)。

技术领域

本发明涉及能够用于癌症免疫治疗的、表达嵌合抗原受体(本说明书中记作“CAR”。)的免疫细胞(本说明书中记作“CAR表达免疫细胞”。)、代表性地为表达CAR的T细胞(本说明书中记作“CAR-T细胞”。)和用于制作CAR表达免疫细胞(CAR-T细胞等)的表达载体。更详细而言，本发明涉及表达指定的细胞因子和趋化因子的CAR表达免疫细胞(CAR-T细胞等)和用于制作该CAR表达免疫细胞的表达载体。

背景技术

通过给药CAR-T细胞进行的癌症免疫疗法虽然在白血病、淋巴瘤等造血系统恶性肿瘤中显示出有效性，但是，尤其是在实体瘤中，由于CAR-T细胞在生物体内的存活效率低、由癌细胞所具有的肿瘤免疫逃逸机制引起的肿瘤微环境中的CAR-T细胞的活性抑制等课题而存在看不到治疗效果的癌症类型、病例。因此，尤其需要在实体瘤中显示治疗效果的、抗肿瘤活性更高的CAR-T细胞。

专利文献1和非专利文献1记载了抗肿瘤活性优于以往的CAR-T细胞的、表达IL-7和CCL19的CAR-T细胞。但是，专利文献1和非专利文献1中，没有包含关于除此以外的细胞因子与趋化因子的组合的具体记载。

非专利文献2记载了独立于CAR的信号传送且持续性得到提高的、表达膜结合型嵌合IL-15(mbIL-15)的CAR-T细胞。但是，非专利文献2中，没有包含关于mbIL-15与CCL19等趋化因子的组合的具体记载。

非专利文献3中记载了：通过使用IL-15与IL-15Rαsushi结构域经由柔性接头连接而成的融合蛋白，与以往的组合使用IL-15与IL-15Rαsushi结构域的情况相比，能够增强淋巴细胞(NK细胞、NK-T细胞、记忆CD8阳性细胞)的增殖、树突细胞的活化等中的活性。但是，非专利文献3中，没有包含关于IL-15和IL-15Rαsushi结构域与CCL19等趋化因子的组合的具体记载。

非专利文献4中记载了：通过转染小鼠的IL-15和IL-15Rα的分泌型融合蛋白，CD8阳性T细胞的存活能力和增殖能力得到提高。但是，非专利文献4中，没有包含关于IL-15与CCL19等趋化因子的组合的具体记载。

非专利文献5中记载了单链IL-27(用柔性接头连接p28和EBI3而成)和其对炎症性肠病(IBD)的治疗的效果。但是，非专利文献5中，没有包含关于CAR-T细胞、以及关于单链IL-27与CCL19等趋化因子的组合的具体记载。

专利文献2中公开了表达重组IL-7、重组IL-15或这些的组合的的T细胞，记载了这样的细胞因子的表达使T细胞的存活提高。但是，专利文献2中，没有包含关于CAR-T细胞、以及关于上述特定的细胞因子与CCL19等趋化因子的组合的具体记载。

专利文献3中记载了含有编码IL-2、IL-4、IL-7、IL-15或这些的组合的表达构建体和CAR构建体的经改造的自然杀伤T细胞。但是，专利文献3中，没有包含关于上述特定的细胞因子与CCL19等趋化因子的组合的具体记载。

专利文献4中记载了表达IL-7、IL-15(IL-15/IL-15Rα融合蛋白)、IL-21之类的膜结合型细胞因子的CAR-T细胞。但是，专利文献4中，没有包含关于上述特定的细胞因子与CCL19等趋化因子的组合的具体记载。

专利文献5中记载了表达IL-15的、靶向CD19的CAR-T细胞。但是，专利文献5中，没有包含关于IL-15与CCL19等趋化因子的组合的具体记载。