[发明专利]肌肉靶向复合物及其用于治疗蓬佩病的用途

说明书

本公开内容的一些方面涉及包含与分子载荷共价连接的肌肉靶向剂的复合物。在一些实施方案中，所述肌肉靶向剂与肌细胞上的内化细胞表面受体特异性结合。在一些实施方案中，所述分子载荷降低细胞中的糖原水平。

相关申请

本申请要求2018年8月2日提交的标题为“MUSCLE TARGETING COMPLEXES ANDUSES THEREOF FOR TREATING POMPE DISEASE”的美国临时申请No.62/713,959的申请日权益，其内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本申请涉及用于向细胞递送分子载荷(molecular payload)(例如，寡核苷酸)的靶向复合物及其用途，特别是涉及疾病治疗的用途。

序列表的引用

本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表以2019年7月31日创建的大小为65KB的名为D082470003WO00-SEQ.txt的文件提供。序列表的电子格式中的信息通过引用整体并入本文。

背景技术

溶酶体贮积病是由溶酶体水解酶或跨膜蛋白的缺陷引起的一组遗传性疾病。这些疾病通常以进行性的多种未消化底物的积累和细胞运输途径的失调为特征。蓬佩病(pompedisease，PD)是一种常染色体隐性遗传的溶酶体贮积病，特征在于肌细胞中糖原的积累，其导致进行性肌肉无力、肌张力降低(张力减退)、心脏增大和呼吸困难。在严重的情况下症状通常在出生时就存在，尽管发作可能在整个生命中发生，并且蓬佩病在美国影响约40,000人中的1人。蓬佩病是由GAA基因中的突变引起的，该基因编码酶酸性α-葡糖苷酶。GAA酶在溶酶体中将糖原分解成葡萄糖。GAA基因中的某些突变导致酶活性降低，从而导致溶酶体中糖原的毒性积累。在一个实例中，c.-32-13T＞G(IVSl)GAA变体在前mRNA剪接过程中促进外显子2跳读，并且是儿童/成人疾病形式的最常见变体。糖原由多种酶合成，包括糖原合酶1(由GYS1基因编码)。糖原积累对肌细胞特别有毒，导致PD的进行性肌肉无力症状。用于PD的当前治疗涉及酶替代治疗，其涉及施用重组的野生型人GAA蛋白。

发明概述

根据一些方面，本公开内容提供了靶向肌细胞以用于将分子载荷递送至那些细胞的复合物。在一些实施方案中，本文提供的复合物特别可用于递送寡核苷酸，所述寡核苷酸纠正对象(例如在编码溶酶体酶酸性α葡糖苷酶(GAA)的基因中具有c.-32-13T＞G(IVS1)变体的对象)的细胞中的异常剪接。在一些实施方案中，本文提供的复合物还特别可用于递送分子载荷，其抑制糖原合成途径中的酶(例如GYS1)的表达从而降低糖原合成，例如在患有或怀疑患有蓬佩病的对象中。在一些实施方案中，本文提供的复合物特别可用于将递送野生型GAA蛋白或编码该蛋白质的多核苷酸的分子载荷递送至对象，例如递送至患有或怀疑患有蓬佩病的对象。在一些实施方案中，可施用(例如同时施用)两种或更多种复合物以治疗患有或怀疑患有蓬佩病的对象。因此，在一些实施方案中，本文中提供的复合物包含与肌细胞表面上的受体特异性结合的肌肉靶向剂(例如，肌肉靶向抗体)，以用于将分子载荷递送至肌细胞。在一些实施方案中，复合物通过受体介导的内化被摄取到细胞中，然后分子载荷可被释放以在细胞内部执行功能。例如，经工程化以递送寡核苷酸的复合物可释放寡核苷酸，使得寡核苷酸可纠正剪接变体(例如纠正GAA中的外显子2跳读)或抑制基因表达(例如肌细胞中GYS1的表达)。在一些实施方案中，经工程化以递送野生型GAA蛋白的复合物可释放野生型GAA蛋白或编码野生型GAA蛋白的重组核酸，以提高细胞GAA活性。在一些实施方案中，通过连接复合物的寡核苷酸和肌肉靶向剂的共价接头的内体切割而释放寡核苷酸。

本公开内容的一些方面包括复合物，所述复合物包含与分子载荷共价连接的肌肉靶向剂，所述分子载荷配置成用于降低肌细胞中的糖原水平，其中肌肉靶向剂与肌细胞上的内化细胞表面受体特异性结合。