[发明专利]癌抗原特异性CD8+T细胞的制备及冷冻保存方法在审
| 申请号： | 201980066897.9 | 申请日： | 2019-08-12 |
| 公开（公告）号： | CN113302285A | 公开（公告）日： | 2021-08-24 |
| 发明（设计）人： | 權炳世;金永昊;金纹基;金光熙;姜儒贤;S·R·李 | 申请（专利权）人： | 优特力克斯有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783;G01N33/569;A01N1/02;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陶家蓉;钱文宇 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抗原 特异性 cd8 细胞 制备 冷冻 保存 方法 | ||
1.制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法，包括：
(a)从包含癌抗原特异性CD8+T细胞的PBMC中激活CD8+T细胞，然后表达这些CD8+T细胞的共刺激因子；
(b)在步骤(a)中激活的细胞中选择表达共刺激因子的CD8+T细胞；
(c)增加步骤(b)中选择的CD8+T细胞的数量；和
(d)冷冻步骤(c)中获得的CD8+T细胞。
2.如权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法，还包括步骤(e)：解冻在步骤(d)中冷冻的CD8+T细胞。
3.根据权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法，其中所述癌抗原是从由hTERT、NY-ESO1、MAGE-A3、WT1和EBV组成的组中选择的至少一种。
4.根据权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法，其中步骤(b)使用封闭系统流式细胞仪进行。
5.根据权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法，其中在步骤(d)中，当表达共刺激因子的CD8+T细胞的数量大于或等于预定的每毫升细胞数量时，进行冷冻。
6.根据权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法，其中，在步骤(d)中，当CD8+T细胞的数量至少为预定的每毫升细胞数量并且表达所述共刺激因子的CD8+T细胞的比例至少为预定比例时进行冷冻。
7.根据权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法，其中步骤(d)包括检测CD8+T细胞的数量和表达共刺激因子的CD8+T细胞的比例的步骤。
8.根据权利要求2所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法，还包括步骤(f)：增加步骤(e)中获得的CD8+T细胞数量。
9.根据权利要求1所述的制备癌抗原特异性CD8+T细胞的方法，其中所述共刺激因子是选自由CD28、CTLA-4、ICOS、PD1、BTLA、HVEM、CD27、OX40、4-1BB、CD30和SLAM组成的组的一种或多种。
10.制备癌症治疗组合物的方法，包括：
(a)从包含癌抗原特异性CD8+T细胞的PBMC中激活CD8+T细胞，然后表达这些CD8+T细胞的共刺激因子；
(b)在步骤(a)中激活的细胞中选择表达共刺激因子的CD8+T细胞；
(c)增加步骤(b)中选择的CD8+T细胞的数量；和
(d)冷冻步骤(c)中获得的CD8+T细胞。
11.根据权利要求10所述的制备癌症治疗组合物的方法，还包括步骤(e)，解冻在步骤(d)中冷冻的CD8+T细胞。
12.包含通过以下步骤制备的癌抗原特异性CD8+T细胞的癌症治疗组合物：
(a)从包含癌抗原特异性CD8+T细胞的PBMC中激活CD8+T细胞，然后表达这些CD8+T细胞的共刺激因子；
(b)在步骤(a)中激活的细胞中选择表达共刺激因子的CD8+T细胞；
(c)增加步骤(b)中选择的CD8+T细胞的数量；和
(d)冷冻步骤(c)中获得的CD8+T细胞。
13.根据权利要求12所述的癌症治疗组合物，还包括步骤(e)，解冻在步骤(d)中冷冻的CD8+T细胞。
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