[发明专利]NK接合子分子及其使用方法

说明书

提供了用于激活NK细胞以刺激免疫应答以用于治疗癌症和其他障碍的组合物。在一个实施例中，本发明提供了一种化合物，其包括与CD16结合的NK接合结构域；可操作地连接到NK接合结构域的NK激活结构域；和选择性地结合至靶细胞并与NK激活结构域和NK接合结构域可操作地连接的靶向结构域，其中所述靶向结构域结合至CLEC12A。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年10月19日提交的美国序列号62/747,983的35 U.S.C.§119(e)项下的优先权的权益，其全部内容通过引用以其整体并入本文。

政府资助

本发明是在政府的支持下，在美国国立卫生研究院授予的CA111412和CA65493且在美国国家癌症研究所授予的CA36725、CA72669、CA077598和CA197292以及在美国国防部授予的CA150085下完成的。政府对本发明具有一定的权利。

序列表

所附序列列表中的材料据此通过引用并入到本申请中。随附的名称为GTBIO2090_1WO_Sequence_Listing.txt的序列表文本文件创建于2019年10月15日并且为23kb。可以在使用Windows OS的计算机上使用Microsoft Word访问该文件。

发明背景

技术领域

本发明总体上涉及免疫疗法，并且更具体地涉及可用于使自然杀伤(NK)细胞参与免疫应答的组合物。

背景技术

自然杀伤(NK)细胞是能够进行免疫监视的先天性免疫系统的细胞毒性淋巴细胞。与细胞毒性T细胞一样，NK细胞递送大量膜穿透和凋亡诱导颗粒酶和穿孔素颗粒。与T细胞不同，NK细胞不需要抗原引发，并且在没有MHC识别的情况下，通过接合激活受体来识别靶。NK细胞表达CD16，一种与IgG抗体的Fc部分结合并参与抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)的激活受体。NK细胞通过IL-15来调节，其可以诱导增加的抗原依赖性细胞毒性、淋巴因子激活的杀伤活性，和/或介导干扰素(IFN)、肿瘤坏死因子(TNF)和/或粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)应答。所有这些IL-15激活的功能都有助于改善癌症防御。

在治疗上，例如，当NK细胞的过继转移与淋巴耗竭化疗和IL-2联合使用以刺激NK细胞的存活和体内扩增时，NK细胞的过继转移可以诱导患有难治性急性髓性白血病(AML)的患者的缓解。这种疗法可能受到抗原特异性的缺乏和IL-2介导的调节性T(Treg)细胞诱导的限制，该细胞抑制NK细胞的增殖和功能。生成一种驱动NK细胞抗原的特异性、扩增和/或持久性，同时绕过Treg抑制的负面影响的试剂可以增强基于NK细胞的免疫疗法。

发明内容

本发明涉及用于激活NK细胞以刺激免疫应答以用于治疗癌症和其他障碍的化合物和组合物。在一个实施例中，本发明提供了一种化合物，所述化合物包含NK接合结构域；可操作地连接到NK接合结构域的NK激活结构域；和选择性地结合至靶细胞并与NK激活结构域和NK接合结构域可操作地连接的靶向结构域，其中所述靶向结构域选择性地结合至CLEC12A。

在一些实施例中，NK接合结构域包含选择性地结合至CD16的部分。在一些实施例中，NK接合结构域部分包含抗体或其结合片段或纳米体，也被称为单结构域抗体(sdAb或VHH)。在一些实施例中，抗体结合片段包含scFv、F(ab)2或Fab。在一些实施例中，抗体或其结合片段或纳米体是人的或人源化的。在一些实施例中，抗体或其结合片段或纳米体是骆驼科的。

在一些实施例中，NK激活结构域包含细胞因子或其功能片段。在一些实施例中，NK激活结构域包含IL-15或其功能片段。在一些实施例中，IL-15包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列或其功能性变体。在一个方面中，与SEQ ID NO:9相比，IL-15的功能性变体包含N72D或N72A氨基酸取代。