[发明专利]用于基于细胞的疗法或治疗的测定

说明书

本公开内容提供用于确定基于细胞的疗法或治疗的效能的体外方法。在替代实施方案中，提供用于确定基于细胞的疗法或治疗(包括用于治疗视网膜变性的那些疗法或治疗)的效能的组合物，包括制品及试剂盒；以及方法，包括(或包括使用)定量体外测定。

技术领域

相关申请

本申请案主张2018年9月27日申请的美国临时申请案第62/737,359号的优先权及权益，其内容以全文引用的方式并入本文中。

本发明大体上关于基于细胞的测定及疗法。在替代实施方案中，提供用于确定基于细胞的疗法或治疗(包括用于治疗视网膜变性的那些疗法或治疗)的效能的组合物，包括制品及试剂盒；以及方法，包括(或包括使用)定量体外测定。

背景技术

视网膜变性指由视网膜中感光细胞的进展性及不可逆衰退及死亡所引起的退化或变性。感光细胞的死亡可引起失明。已考虑将干细胞及其他多能细胞用于治疗患有视网膜变性的患者且干细胞及其他多能细胞可自多种来源分离，包括胚胎组织、成人大脑、基因操控真皮纤维母细胞及甚至视网膜。然而，测试这些基于细胞的疗法及治疗，更一般地关于广泛多种疾病(包括癌症及自体免疫病状)的基于细胞的疗法及治疗仍然困难的，因为在人体或模型生物体中活体内测定成本高、耗时且通常缺少定量结果。因此，本领域中需要稳固、低本高效、节约时间且定量的体外测定，用于确定基于细胞的疗法或治疗的效能，包括用于视网膜变性的那些疗法或治疗。

发明内容

本公开内容提供一种用于测量基于细胞的疗法或治疗的效能的方法，所述方法包括以下步骤：用毒性化合物及条件培养基(conditioned media)培育第一多个细胞，其中所述条件培养基包括用于培养基于细胞的疗法或治疗的培养基；用毒性化合物及对照培养基培育至少第二多个细胞；确定第一多个细胞及至少第二多个细胞的生活力；及比较第一多个细胞的生活力与第二多个细胞的生活力，从而确定基于细胞的疗法或治疗的效能。效能可为第一多个细胞的生活力与第二多个细胞的生活力的比率。

本公开内容提供一种用于测量基于细胞的疗法或治疗的效能的方法，所述方法包括以下步骤：用毒性化合物及条件培养基培育第一多个细胞，其中所述条件培养基包括用于培养基于细胞的疗法或治疗的培养基；用毒性化合物及对照培养基培育至少第二多个细胞；确定第一多个细胞及至少第二多个细胞的生活力；确定第一多个细胞及至少第二多个细胞中的细胞凋亡活性；确定第一多个细胞的倍数变化保护值，其中倍数变化保护值为第一多个细胞的生活力与第一多个细胞中的细胞凋亡活性的比率；确定至少第二多个细胞的倍数变化保护值，其中倍数变化保护值为至少第二多个细胞的生活力与至少第二多个细胞中的细胞凋亡活性的比率；及确定基于细胞的疗法或治疗的效能，其中效能为第一多个细胞的倍数变化保护值与至少第二多个细胞的倍数变化保护值的比率。

前述方法可进一步包括比较基于细胞的疗法或治疗的效能与预定截止值(predetermined cutoff value)，其中如果效能大于预定截止值，则基于细胞的疗法或治疗被鉴定为具有足够的效能以施用至个体。

前述方法可进一步包括：比较基于细胞的疗法或治疗的效能与预定截止值；及当效能大于预定截止值时向有需要的个体施用至少一种治疗上有效剂量的细胞疗法或治疗。

预定截止值可为约2。

基于细胞的疗法或治疗可包括视网膜祖细胞(retinal progenitor cell，RPC)、视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cell，RPE)、ARPE-19细胞、神经干/祖细胞、间充质干细胞、CD34+细胞、干/祖细胞、白细胞、纤维母细胞或其任何组合。基于细胞的疗法或治疗包括RPC。