[发明专利]高通量高效细胞转染的方法及装置

权利要求书

1.将有效载荷导入细胞的方法，所述方法包括：

将细胞从第一培养箱引导至包含多个微流体装置的组件；

将细胞从细胞培养基中驱入电穿孔介质；

以鞘流结构向电穿孔介质中的细胞施加电场，其中电穿孔介质在中央流中流动；

转移或允许有效载荷转移至细胞中。

2.根据权利要求1所述的方法，还包括将含有有效载荷的细胞从电穿孔流体驱动到细胞培养液中。

3.根据权利要求2所述的方法，还包括将含有所述有效载荷的细胞储存在第二培养箱中。

4.根据权利要求1所述的方法，还包括将含有所述有效载荷的细胞施用于需要诊断、预防或治疗的受试者。

5.制备用于免疫疗法的细胞的方法，所述方法包括：

将细胞从第一缓冲液转移到电穿孔缓冲液中，其中第一缓冲液为细胞培养基；

通过电穿孔使细胞透化；

允许有效载荷转移到透化的细胞中；

将含有有效载荷的细胞传送到第二缓冲液中，

其中，所述方法以自动且连续的流动模式进行，并且

其中，吞吐量可以为每分钟至少400万个细胞。

6.用于将货物自动且连续地流动以转移到细胞中的系统，所述系统包括：

用于储存细胞的第一培养箱；

电穿孔组件，包括支撑以平行结构配置的多个微流体通道的层；

第一缓冲液交换器，用于将细胞从细胞培养基驱入电穿孔介质中；

第二缓冲液交换器，用于将细胞从电穿孔介质驱入培养基；和

控制器。

7.根据权利要求6所述的系统，还包括用于将电穿孔缓冲液输送至电穿孔组件、用于将细胞输送至第一缓冲液交换器和/或用于将细胞从第二缓冲液交换器输送至第二培养箱的泵系统。

8.根据权利要求6所述的系统，其中每个微流体通道具有三叉入口和出口。

9.根据权利要求6所述的系统，其中所述电穿孔组件还包括电极层。

10.根据权利要求6所述的系统，其中每个微流体通道被配置为支撑中央流和侧鞘流。

11.一种电穿孔组件，包括：

通道层，包括以平行结构配置的至少两个微流体通道；

电极层，包括用于每个微流体通道的一对电极；

端口层，用于流体连接到微流体通道的三叉入口和出口，

其中，所述层以层压型结构堆叠。

12.根据权利要求11所述的电穿孔组件，还包括窗口层和/或电极框架层。

13.根据权利要求11所述的电穿孔组件，其中所述层彼此粘附。

14.应用权利要求11所述的电穿孔组件将货物转移到细胞中的方法。

15.将货物批量转移到细胞中的系统，包括：

将细胞维持在所需温度的培养箱；

防止细胞在培养箱中沉淀的搅拌设备；

将细胞转移至电穿孔缓冲液中的缓冲液交换器；

对电穿孔缓冲液中的细胞进行电穿孔以转移货物的流式电穿孔装置；和

从流式电穿孔装置中接收细胞的培养箱。

16.根据权利要求15所述的系统，其中，所述搅拌设备包括在细胞贮存器内的叶轮。

17.根据权利要求15所述的系统，还包括在所述培养箱和所述缓冲液交换器之间的泵。

18.根据权利要求17所述的系统，还包括使电穿孔缓冲液流入所述缓冲液交换器的泵。