[发明专利]CXCR3的可切割激活剂及其使用方法

说明书

描述了重组C‑X‑C基序趋化因子配体(CXCL)肽，其经修饰以引入蛋白酶，例如在炎症反应过程中激活的蛋白酶的切割位点。CXCL肽具有激活CXCR3的能力，直到被蛋白酶切割为止。CXCL肽的蛋白水解切割使促炎反应最小化并抑制纤维化发展。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年10月22日提交的美国申请号62/748,711的权益，其全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本公开涉及C-X-C趋化因子受体3(CXCR3)的肽激活剂，其可被存在于炎症部位的蛋白酶切割，及其使用方法，例如用于抑制纤维化而不引起炎症。

背景技术

趋化因子受体CXCR3是C-X-C趋化因子受体家族中的G蛋白偶联受体。CXCR3主要在激活的T淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞上表达。CXCR3的配体包括C-X-C基序趋化因子配体4(CXCL4)、CXCL9、CXCL10和CXCL11。这些配体与CXCR3结合产生多效作用，包括对粘附细胞的抗纤维化作用，以及对先天免疫系统细胞的促炎和纤维化作用。当通过在成纤维细胞、内皮细胞和其他贴壁细胞上表达的CXCR3受体信号传导时，CXCR3的激活剂可限制纤维化和血管生成。然而，免疫细胞上CXCR3的激活可促进炎症性瘢痕形成和纤维化。

发明内容

本文描述了重组C-X-C基序趋化因子配体(CXCL)肽，其经修饰以引入蛋白酶(例如在炎症反应过程中激活的蛋白酶)的切割位点。公开的肽具有激活CXCR3的能力，直到被蛋白酶切割为止。CXCL肽的蛋白水解切割使促炎反应最小化并抑制纤维化发展。

本文提供了相对于野生型CXCL氨基酸序列经修饰的重组CXCL肽，以引入蛋白酶的切割位点。在一些实施方式中，CXCL是C-X-C趋化因子受体3(CXCR3)的配体，例如CXCL10、CXCL4、CXCL9或CXCL11。在一些实施方式中，蛋白酶是组织蛋白酶、弹性蛋白酶或基质金属蛋白酶(MMP)。

还提供了组合物，其包括本文公开的重组CXCL肽。组合物可以被配制，例如，用于局部、鼻内、吸入、静脉内、玻璃体内、肌内、皮内或皮下施用。在一些实施方式中，组合物为单位剂量形式。

还提供了抑制受试者纤维化的方法。在一些实施方式中，该方法包括向受试者施用本文公开的CXCL肽或组合物。在一些实例中，受试者患有创伤、自身免疫性疾病、炎性疾病或病症、或者医源性疾病或病症。

进一步提供了抑制受试者中血管生成的方法。在一些实施方式中，该方法包括向受试者施用本文公开的CXCL肽或组合物。在一些实例中，所述受试者患有眼部血管生成性疾病。

通过以下参考附图进行的详细描述，本发明的前述和其他目的、特征和优点将变得更加显而易见。

附图说明

图1A-1B：CXCL10衍生的可切割肽在阻断脉络膜新生血管形成(CNV)中的功效。在CNV的小鼠模型中检测修饰的肽110(SEQ ID NO:2)。向小鼠施用溶媒、肽110、阳性对照肽(肽102、105或107)或相应的乱序肽作为对照。肽以1μg(图1A)或3μg(图1B)的剂量施用。Exp＝实验肽；CTRL＝乱序对照肽。

序列表

使用核苷酸碱基的标准字母缩写和氨基酸的三个字母代码(如37C.F.R.1.822所定义)显示在所附序列表中列出的核酸和氨基酸序列。每个核酸序列仅显示一条链，但是互补链应理解为包括任何参考显示链的内容。序列表以ASCII文本文件的形式提交，创建于2019年10月16日，13.2KB，其通过引用并入本文。在所附序列表中：

SEQ ID NO:1是野生型CXLC10肽的氨基酸序列。

SEQ ID NO:2-7是修饰的CXCL10肽的氨基酸序列。每个肽的C端脯氨酸残基任选地被酰胺化或甲基化。