[发明专利]一种用于直接分化多能性干细胞来源间充质干细胞的培养基、用其制备间充质干细胞的方法以及由此制备的间充质干细胞

说明书

本发明涉及一种用于直接分化胚胎干细胞来源间充质干细胞的培养基、用其制备间充质干细胞的方法、由此制备的间充质干细胞以及包括其的细胞治疗剂，根据一方面的培养基组合物和方法，不仅可以在短时间内以高产率制备间充质干细胞，而且由于没有胚状体形状的步骤，因此制备工艺简单，并且可以获得具有均质性的细胞，从而具有可以在比现有方法更短的时间内提供细胞治疗剂的效果。

技术领域

本发明涉及一种直接分化多能性干细胞，例如胚胎干细胞来源间充质干细胞的培养基、用其制备间充质干细胞的方法、由此制备的间充质干细胞以及包括其的细胞治疗剂。

背景技术

作为使用人胚胎干细胞制备间充质干细胞的现有技术，有一种在形成胚状体后处理TGF-β抑制剂14天的制备方法。TGF-β抑制剂的处理是为了通过抑制胚状体的内胚层系细胞分化来容易确保中胚层系细胞而实施的。另外，通常在用人胚胎干细胞制备间充质干细胞时使用的TGF-β抑制剂中，SB431542的处理量为10μM以上。在TGF-β抑制剂中，用1μM以上的SB431542处理具有抑制内胚层系分化所需的转录因子的活性并增加中胚层系分化所需的转录因子的活性的作用。另外，在不经过胚状体的直接分化方法中，也存在通过用TGF-β抑制剂之一的SB431542处理诱导分化的情况，但据报道，在大多数情况下，在10μM以上的高浓度下需要11天以上的药物处理期间。因此，根据现有报道的方法制备的间充质干细胞需要长时间才可以表现出高含量的中胚层特性。此外，即使形成大小和形状均一的胚状体以使用，由于构成胚状体的内部和外部的细胞中微环境的差异，所处理药物的效果也可能不均匀，因此可以存在会影响分化效率和分化细胞性质的技术不稳定性问题。

据此，尽管其是基于细胞的增殖现象制备的生物学治疗剂，但其制备过程中并未采取任何预防或补充措施来防止可能由增殖现象引起的细胞衰老和突变的风险，因此需要解决该问题的技术方案。

发明内容

技术问题

本发明一方面提供一种用于诱导多能性干细胞分化为间充质干细胞的培养基组合物，其包括DNA修复剂(DNA repair agent)和ROCK(Rho-associated,coiled-coilcontaining protein kinase)抑制剂。

本发明另一方面提供一种DNA修复剂(DNA repair agent)和ROCK(Rho-associated,coiled-coil containing protein kinase)抑制剂在制备用于诱导多能性干细胞分化为间充质干细胞的培养基组合物中的用途。

本发明另一方面还提供一种多能性干细胞来源间充质干细胞的制备方法，其包括：培养已分离的多能性干细胞；以及将所述培养的多能性干细胞在含有DNA修复剂(DNArepair agent)和ROCK(Rho-associated,coiled-coil containing protein kinase)抑制剂的培养基中培养以诱导分化为间充质干细胞。

本发明另一方面还提供一种在DNA修复剂(DNA repair agent)和ROCK(Rho-associated,coiled-coil containing protein kinase)抑制剂的存在下诱导分化的多能性干细胞来源间充质干细胞。

本发明另一方面还提供一种细胞治疗剂，其包括所述多能性干细胞来源间充质干细胞。

本发明另一方面还提供一种所述多能性干细胞来源间充质干细胞在制备细胞治疗剂中的用途。

本发明另一方面还提供一种疾病的治疗方法，所述方法包括：将所述多能性干细胞来源间充质干细胞施用于个体。

技术方案