[发明专利]用于将mRNA转染到细胞中的组合物及其应用

权利要求书

1.适于将信使RNA(mRNA)转染到细胞中的组合物，所述组合物包含mRNA、至少一种中性脂质和式(I)的阳离子脂质：

其中，

-R₁表示C₁-C₄烃链或C₁-C₄羟基化链；

-R₂、R₃、R₄和R₅可以相同或不同，表示H；C₆-C₃₃饱和或不饱和的直链或支链烃链；或者饱和或不饱和C₆环；

-(CH₂)_n表示烃链连接基，其中n表示0至4(含端值)的整数；

-A^-表示生物相容性阴离子。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述至少一种中性脂质选自：磷脂酰丝氨酸(PS)、磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰肌醇(PI)衍生物、脂质-聚乙二醇(PEG)缀合物、胆固醇衍生物和磷脂酰乙醇胺衍生物，例如1,2-二油酰-SN-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)、1,2-二植烷酰基-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DPyPE)、棕榈酰基亚油酰基磷脂酰乙醇胺(PaLiPE)、二亚油酰基磷脂酰乙醇胺(DiLiPE)、磷脂酰乙醇胺(PE)，优选地是DOPE或DPyPE，更优选地是DPyPE。

3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中n表示2至4(含端值)的整数，优选n＝4，且R₂表示C₆-C₃₃饱和或不饱和的直链或支链烃链，或者饱和或不饱和C₆环。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中n表示2至4(含端值)的整数，并且R₁表示C₁、C₂或C₄烃链或C₂羟基化链，优选地，n＝4并且R₁表示C₁或C₄烃链。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述式(I)的阳离子脂质选自以下化合物：

6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述式(I)的阳离子脂质选自以下化合物：

7.根据权利要求6所述的组合物，其中所述式(I)的阳离子脂质选自以下化合物：

8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，其中A^-表示Cl^-或OH^-。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中所述式(I)的阳离子脂质与所述至少一种中性脂质的摩尔比为1:1至1:2，优选1:1.5。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中所述mRNA的5'-端被加帽，优选用以下结构加帽：7-甲基鸟苷结构；帽结构类似物，如抗反向帽类似物(ARCA)；帽0结构，其包括7-甲基鸟苷酸帽；帽1结构，其包括7-甲基鸟苷酸帽和在第一核糖上的甲基化的2'-羟基基团；或帽2结构，其包括7-甲基鸟苷酸帽(m⁷G)和在前两个核糖上的甲基化的2'-羟基基团。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的组合物，其中所述mRNA，特别是所述加帽的mRNA，被进一步3'-端多聚腺苷酸化和/或含有修饰的核苷，例如5-甲氧基尿苷、2-硫尿苷、5-碘尿苷、5-溴尿苷、5-甲基胞苷、5-碘胞苷、5-溴胞苷、2-硫代胞苷、假尿苷、N⁶-甲基腺苷或N¹-甲基鸟苷。