[发明专利]抗人PD-1抗体晶体及其使用方法

权利要求书

1.一种用于产生晶体抗PD-1单克隆抗体(mAb)的方法，包括：

a)混合：

i.包含约5mg/mL至约80mg/mL的所述mAb的水性缓冲溶液，其中所述抗PD-1mAb为派姆单抗或派姆单抗变体，

ii.聚乙二醇(PEG)，和

iii.选自以下的添加剂：咖啡因、茶碱、2’-脱氧鸟苷-5’-单磷酸、生物活性赤霉素和所述生物活性赤霉素的药学上可接受的盐；

以形成结晶溶液，其中该结晶溶液具有约6.0至约8.8的pH，并且包含约2％至约40％重量/体积(w/v)的PEG和约0.1％至约0.30％w/v的添加剂；

b)将所述结晶溶液孵育足以形成晶体的时间段；和

c)任选地从所述溶液收获所述晶体抗PD-1mAb。

2.根据权利要求1所述的方法，其中包含所述mAb的所述水性缓冲溶液进一步包含pH约5.0-约6.0的组氨酸缓冲液。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述PEG和所述添加剂在与包含所述mAb的所述水性缓冲溶液混合之前混合在一起以形成沉淀剂溶液。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中包含所述mAb的所述水性缓冲溶液在与所述添加剂混合前与PEG混合。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中包含所述mAb的所述水性缓冲溶液在与PEG混合前与所述添加剂混合。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述添加剂为赤霉素A3或其药学上可接受的盐。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述添加剂为约0.15％至约0.30％w/v的咖啡因或约0.25％至约0.30％w/v的茶碱。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述添加剂为咖啡因，并且所述结晶溶液进一步包含约1％至约10％w/v的葡聚糖硫酸钠。

9.根据权利要求8所述的方法，其中葡聚糖硫酸钠的量为约5％w/v。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述PEG以约5％至约15％w/v的量存在于所述结晶溶液中。

11.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述PEG以约10％至约30％w/v的量存在于所述结晶溶液中。

12.根据任何前述权利要求所述的方法，其中所述PEG的分子量为约2500至约35000。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述PEG为PEG 3350。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述结晶溶液的pH和所述结晶溶液中存在的PEG的量选自由以下各项组成的组：

a)所述结晶溶液的pH为约6.0，且PEG的量为2-4％w/v，

b)所述结晶溶液的pH为约6.4，且PEG的量为2-6％w/v，

c)所述结晶溶液的pH为约6.8-8.4，且PEG的量为6-12％w/v，和

d)所述结晶溶液的pH为约8.8，且PEG的量为10-12％w/v。

15.根据任何前述权利要求所述的方法，其中所述结晶溶液在约2℃至约37℃的孵育温度下孵育。

16.根据任何前述权利要求所述的方法，其中所述结晶溶液在约18℃至约25℃的孵育温度下孵育。

17.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中所述结晶溶液加热至约50℃，然后冷却至约37℃或更低的温度。