[发明专利]抗人PD-1抗体晶体及其使用方法

说明书

本发明提供了用于产生晶体抗PD‑1单克隆抗体(mAb)的方法，其中所述mAb为派姆单抗或派姆单抗变体，该方法包括(1)混合包含(a)mAb、(b)聚乙二醇(PEG)和(c)添加剂的溶液以形成结晶溶液，所述添加剂选自咖啡因、茶碱、2’‑脱氧鸟苷‑5’‑单磷酸、生物活性赤霉素和所述生物活性赤霉素的药学上可接受的盐；(2)将结晶溶液孵育足够用于晶体形成的时间；和(3)任选地从溶液收获晶体抗PD‑1mAb。在特定实施方案中，PEG为PEG 3350，且添加剂为咖啡因。本发明还涉及通过本文所述方法产生的新型抗人PD‑1mAb晶体。使用几种生化方法对再溶解的晶体悬浮液的表征表明，再溶解的mAb晶体的生物物理性质与完整的抗体起始样品一致。本发明的晶体和方法适用于多种药物应用，例如纯化、储存、制剂和药物递送。

技术领域

本发明涉及产生抗PD-1单克隆抗体的晶体悬浮液的方法。本发明进一步涉及通过本文的方法产生的抗体晶体、包含该晶体的药物组合物及其使用方法。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年10月31日提交的U.S.S.N.62/753,615的权益，其通过引用整体并入本文中。

电子提交的序列表的引用

本申请的序列表通过EFS-Web作为ASCII格式的序列表电子提交，其文件名为“24638WOPCT-SEQLIST-17OCT2019.TXT”，创建日期为2019年10月9日，和大小为10Kb。通过EFS-Web提交的该序列表是本说明书的部分，并通过引用整体并入本文。

背景技术

治疗性和诊断性抗体已成为生物制药行业增长最快的领域。抗体作为治疗剂取得成功的关键方面是开发改进的方法来表达、纯化和鉴定这些蛋白质。一般而言，抗体治疗剂较大(通常大于150kDa)且性质上是复杂的，因而必须以化学计量的量而非催化的量施用。因此，生产和纯化规模已达到先前认为不可能达到的生产水平。还需要为如此大量的复杂分子开发稳定的制剂和递送策略。

开发包含高浓度活性剂(如抗体或抗原结合片段)的稳定制剂对于意图用于对患者进行皮下施用的生物学制剂尤其重要，因为递送给患者的溶液体积大大减小。皮下施用是许多抗体的优选施用方法，部分地是因为它可以实现自身施用或使医疗专业人员(例如药剂师、医生或护士)更容易施用。治疗性抗体传统上以冻干形式或在溶液中制备。冻干的形式可表现出增强的长期稳定性，但需要在使用前重构，使其不是非常适合于自身施用。另一方面，稳定的液体制剂的开发更具挑战性，并且在使用前通常需要冷藏。