[发明专利]用于结合巨菲蛋白的药物测定中的结合竞争剂及其使用方法

说明书

公开了包含结合竞争剂的组合物（其可以用在样品中结合巨菲蛋白的药物的测定中），以及含有它们的试剂盒及其使用方法。

相关申请的交叉引用/通过引用并入声明

主题申请要求2018年11月2日提交的美国临时申请号62/754,913在美国法典第35篇第119(e)条下的权益。以上引用的专利申请的整个内容特此明确地通过引用并入本文。

关于联邦资助研究或开发的声明

不适用。

技术领域

本公开内容涉及用于确定样品中某些类型的药物的水平的化合物、试剂盒和测定规程，所述样品含有所述药物的特异性结合蛋白。本公开内容涉及可用于从其内源结合蛋白置换药物的类似化合物，以及包含它们的试剂盒，以及在药物测定中利用这些置换剂作为结合竞争剂的方法。

背景

身体依靠复杂的免疫应答系统来区分自身物质和非自身物质。有时，为了增加缺陷应答或抑制过度应答，必须控制身体的免疫系统。例如，当将器官诸如肾、心脏、心-肺、骨髓和肝移植到人类中时，身体经常通过被称作同种异体移植物排斥的过程排斥移植的组织。

在治疗同种异体移植物排斥中，经常用药物疗法以受控方式抑制免疫系统。免疫抑制药物是被小心地施用给移植物接受者以帮助防止非自身组织的同种异体移植物排斥的治疗药物。免疫抑制性药物包括（但不限于）：糖皮质激素、细胞抑制剂、抗体、作用于亲免素的药物和其它药物诸如（但不限于）干扰素、阿片剂INF结合蛋白、麦考酚酯、FTY720等。一类特殊的免疫抑制药物包括作用于亲免素的那些药物。亲免素是具有生理学意义的高亲和力、特异性结合蛋白的一个例子。目前已知两种不同的亲免素家族：亲环蛋白和巨菲蛋白（macrophilins）（FK结合蛋白或FKBP，例如，但不限于，FKBP12），后者特异性地结合例如（但不限于）他克莫司、西罗莫司或依维莫司。

预防移植患者中的器官排斥的两种最常施用的免疫抑制性药物是环孢菌素(CSA)和他克莫司(FK506)。在美国和其它国家用作免疫抑制剂的另一种药物是西罗莫司，也被称作雷帕霉素。西罗莫司的衍生物也可用作免疫抑制剂；这样的衍生物包括例如（但不限于）依维莫司等。

他克莫司也被称作FK506，是一种环状聚-N-甲基化的十一肽，其具有免疫抑制活性且从细菌筑波链霉菌（Streptomyces tsukubaensis）No 9993的发酵产物中分离。FK506的结构显示在下面式I中。

式I：

经常与其它免疫抑制药物一起，他克莫司常用于通过抑制免疫系统来减少同种异体器官移植中的移植物排斥。他克莫司具有狭窄的治疗窗，且因此监测血液药物浓度以达到最佳效力是至关重要的。对于他克莫司药物监测，采用单一抗体的竞争性免疫测定是商购可得的，并且已经描述了夹心免疫测定，其应会提供比竞争形式更高的分析灵敏度和特异性以及更宽的动态范围(Wei等人, Clinical Chemistry (2014) 60(4):621-630；和美国专利号8,586,322)。

西罗莫司也被称作雷帕霉素，是由吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）产生的大环内酯抗生素，且已发现其在多种应用中是药学上有用的，尤其是作为免疫抑制剂，例如，用于治疗和预防器官移植排斥和自身免疫疾病。西罗莫司（雷帕霉素）的结构如下面式II所示。

式II：

但是，西罗莫司在较高剂量确实表现出副作用，并且其具有稍微可变的生物利用度。因此，非常需要监测用雷帕霉素治疗的患者中的雷帕霉素的血液水平，以便能够调节剂量从而维持足以实现药理学活性的最低水平并避免任何不适当的副作用风险。最近已经在美国专利号6,635,745、8,039,599和8,039,600中描述了雷帕霉素测定。