[发明专利]VSV嵌合载体

说明书

本发明涉及VSV嵌合载体，其特征在于所述载体包含编码Dandenong病毒(DANDV)或Mopeia病毒(MOPV)的糖蛋白GP的基因并缺乏编码VSV的包膜蛋白G的功能基因。本发明还提供了VSV嵌合载体系统。此外，本发明涉及本发明的VSV嵌合载体和系统的用途，包括在医学中的用途，如在实体肿瘤治疗中的用途。

本发明涉及VSV嵌合载体，其特征在于所述载体包含编码Dandenong病毒(DANDV)或Mopeia病毒(MOPV)的糖蛋白GP的基因且缺乏编码VSV的包膜蛋白G的功能基因。本发明还提供了VSV嵌合载体系统。此外，本发明涉及本发明的VSV嵌合载体和系统的用途，包括在医学中的用途，如在实体肿瘤治疗中的用途。

现有技术的描述

在过去的几十年中，已经对病毒在癌症治疗中的使用进行了深入研究。溶瘤病毒(OV)被认为是癌症治疗中的重要物质。溶瘤病毒提供了肿瘤特异性细胞裂解和免疫刺激的有吸引力的治疗组合。此外，OV可以进行基因修饰以优化肿瘤选择性和增强免疫刺激，并且可以容易地与其他药剂(如检查点抑制性抗体分子和其他免疫治疗剂)组合使用。OV的有效性已在许多临床前研究中以及最近在人体中得到了证明，美国食品药品监督管理局批准了溶瘤疱疹病毒talimogene laherparepvec[1，2]。

迄今为止，正在对各种具有不同特性的病毒进行临床前和临床研究。溶瘤病毒的大小和复杂程度从大型双链DNA病毒(如牛痘病毒(190kb)[3]和1型单纯疱疹病毒(152kb)[4])到小型单链RNA病毒(如水疱性口炎病毒)(VSV)[5,6]，麻疹病毒(MV)[7]或新城疫病毒(NDV)[8]，其基因组大小在11至16kb之间。但是，每个溶瘤病毒平台都有其优点和缺点。显然，一种有前景的溶瘤方法是将不同的病毒与自然允许其复制的肿瘤类型相匹配。另一方面，某些平台具有广泛的天然受体向性，例如基于牛痘和水疱性口炎病毒的载体，可用于许多不同类型的癌症。

基于VSV的载体平台被认为是非常有前途的病毒疗法，这不仅是由于其广泛的受体向性，而且还因为其在允许的细胞中巨大的复制能力以及诱导强烈的CPE的能力，从而引起局部炎症，在被感染的肿瘤内产生免疫反应。然而，在溶瘤病毒疗法中使用野生型VSV有几个缺点。首先，野生型VSV染色被认为具有神经毒性。如果病毒意外穿过血脑屏障并在受治疗个体的大脑内扩散，则野生型VSV可能引起导致死亡的严重脑炎。其次，VSV感染的个体能够以主要针对核蛋白和糖蛋白的高抗体滴度快速引发强烈的体液反应。除了对位于核蛋白内的表位特异的CD8+细胞产生强烈的CTL反应外，与VSV的包膜糖蛋白G结合的中和抗体也被认为对控制VSV感染是重要的。靶向VSV的糖蛋白G的中和抗体能够限制病毒传播，并且它们能够介导保护个体免受VSV再感染。然而，载体中和限制了溶瘤剂向癌症患者的重复应用。

为了消除VSV野生型的这些缺点，在WO 2010/040526中描述了名为VSV-GP的重组VSV载体。在VSV-GP中，被认为是神经毒性和载体中和的主要决定因素的内源性糖蛋白VSV-G的编码区被淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)株WE-HPI的包膜糖蛋白GP替代。用LCMV-GP(WE HPI)替代VSV病毒包膜蛋白G所提供的优势为(i)VSV-G介导的神经毒性的丧失[9]和(ii)仅在小鼠模型中缺乏抗体的载体中和[10,11]。然而，仍然需要中和抗体诱导降低的并因此用于治疗中的适合性提高的载体。

因此，本发明要解决的技术问题是提供改进的VSV嵌合载体以及相应的用途和方法。通过本文提供的和要求保护的实施方案解决了该技术问题。

发明概述