[发明专利]含有邻苯二甲醛的连接体及其用于制备抗体-药物缀合物的用途

说明书

本发明涉及新的含有邻苯二甲醛(OPA)的连接体(OPA‑L)以及经由苯并[c]吡咯酮的形成制备抗体药物缀合物(ADC)的OPA‑L的用途，所述苯并[c]吡咯酮通过在抗体上的伯胺(例如，赖氨酸的残基)和邻苯二甲醛的反应形成。该OPA‑L的优势是高反应性，且可被应用在不同类型的抗体中以形成稳定连接的缀合物。制备ADC的OPA‑L的用途对于温和且宽泛的缀合条件是有利的，例如，可以使用低百分比的所需有机溶剂、宽范围的pH和温度。

技术领域

本发明涉及新的含有邻苯二甲醛(OPA)的连接体(linker)(OPA-L)以及经由苯并[c]吡咯酮的形成制备抗体药物缀合物(conjugate)(ADC)的OPA-L的用途，所述苯并[c]吡咯酮通过在抗体上的伯胺(例如，赖氨酸的残基)和邻苯二甲醛的反应形成。

背景技术

抗体-药物缀合物(ADC)是用于疾病治疗的新靶向药物。ADC含有用于靶向的抗体、用于药物连接的连接物(connector)和连接体以及作为效应物的高效力的有效负荷(payload)。自2011年Adcetris和2013年Kadcyla被美国FDA批准以来，ADC药物开发已经广泛用于癌症的治疗。

对于药物连接，使用在抗体和连接体-有效负荷(即，连接体-药物)上都具有高反应性和稳定性的官能团用于偶联(coupling)，以形成稳定的共价键。常规的抗体-药物缀合物通常通过两种化学策略产生，基于赖氨酸的缀合(conjugation)和基于来自链间的硫化物键还原的半胱氨酸的缀合。对于在赖氨酸残基上的伯胺基团的反应，在连接体-有效负荷上最广泛地使用的连接物是NHS酯(即N-羟基琥珀酰亚胺)。但是NHS酯在抗体-药物缀合物生产中的应用受到其固有性质的限制，例如，NHS酯和伯胺之间的反应在酸性条件下非常缓慢，因此需要在具有高pH值(即7.0)的缓冲液中进行缀合，这对抗体有时是不友好的，并且NHS在碱性条件下易于水解，这使得缀合后游离药物的纯化和鉴定更加复杂。另外，由于NHS酯对在抗体上的伯胺的低反应性，该反应需要在高温(22℃)下进行。甚至由于低溶解度，由NHS酯制备的连接体-有效负荷(即SMCC-DM1)需要更多的有机溶剂以被完全溶解在反应体系中，这增加了抗体聚集的风险。

基于独特的生物物理、生物化学和药理学特性，重链抗体(HcAb)在抗体药物发现中变得越来越重要。但是，由于HcAb的小尺寸且缺少赖氨酸残基，使用含有NHS酯的连接体-有效负荷难以获得高的用于ADC的药物抗体比(DAR)。

由环境中的不稳定性引起的ADC药物的毒性是在疾病治疗中应用的另一个重要问题。在这种情况下，连接体的降解导致有毒药物从抗体中释放，并导致脱靶毒性。在这种情况下，当前的连接体(即SMCC)具有这种不稳定性问题。通过这种连接体产生的ADC在血浆中不稳定，因此它们在药理学和毒理学中可能具有较差的性质。

因此，在现有技术中迫切需要提供具有高反应性、高稳定性、高溶解度并且对用于缀合的抗体友好的连接体，这对于ADC的形成是有益的。

发明内容

本申请的发明人惊奇地发现，本文所描述的OPA-L比通过NHS酯形成的酰胺键更稳定，通过使用OPA-L可以测试宽的缀合条件，并且用OPA-L产生的ADC比用含有NHS酯的连接体产生的ADC具有更好的血浆稳定性。简言之，本文所描述的OPA-L具有高反应性、高稳定性、高溶解度，并且对用于缀合的抗体是友好的，且对基于HcAb的缀合也是友好的。