[发明专利]具有稳定的Fc受体表达的IL-2依赖性NK-92细胞

权利要求书

1.根据权利要求32所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述Fc受体为CD16(SEQ IDNO:1)，其中所述修饰的NK-细胞不表达IL-2，并且其中所述群体包含一个或多个所述修饰的NK-细胞。

2.根据权利要求1所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述修饰的NK-细胞包含CD16的核酸(SEQ ID NO:2)。

3.根据权利要求1所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述修饰的NK-细胞具有抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)。

4.根据权利要求1所述的修饰的NK-细胞群体，与激活前所述细胞上的CD16表达水平相比，当所述细胞被激活时所述CD16表达水平降低不超过20％。

5.根据权利要求4所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述NK-细胞群体在激活后未表现出CD16表达的降低或CD16表达降低不超过20％，并且其中所述修饰的NK-细胞在激活开始后保持细胞毒性稳态至少5小时。

6.根据权利要求1-4中任一项所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述细胞比来自供体的NK细胞表达更高水平的CD16。

7.所述修饰的NK-细胞群体，其中与激活前的所述细胞相比，在所述细胞激活后对CD16阳性的细胞的百分比降低不超过20％。

8.根据权利要求4所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述CD16表达通过流式细胞术测量。

9.根据权利要求4所述的群体，其中所述激活为PHA刺激、通过与K562细胞共孵育的先天途径激活或通过与利妥昔单抗和DOHH共孵育的ADCC激活。

10.根据权利要求4所述的群体，其中所述细胞通过选自PMA、离子霉素和LPS的一种或多种化合物激活。

11.根据权利要求4所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述细胞通过接触靶肿瘤细胞被被激活。

12.根据权利要求11所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述靶肿瘤细胞选自K562细胞和SKBR-3细胞。

13.根据权利要求11所述的修饰的NK-细胞群体，其中与所述激活前的所述修饰的NK-细胞相比，所述CD16表达降低不超过10％，或其中。

14.根据权利要求11所述的修饰的NK-细胞群体，其中与所述激活前的所述修饰的NK-细胞相比，所述CD16表达降低不超过5％。

15.根据权利要求11所述的修饰的NK-细胞群体，其中与接触所述靶细胞之前的所述细胞相比，在所述细胞接触所述靶细胞后对CD16阳性的细胞的百分比降低不超过10％。

16.根据权利要求4所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述NK-细胞通过接触抗体和靶细胞而被激活，其中所述孵育导致ADCC。

17.根据权利要求16所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述抗体为抗CD20抗体，且所述靶细胞为DOHH-2细胞。

18.根据权利要求16所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述抗体为抗HER2抗体，且所述靶细胞为SKBR3细胞。

19.根据权利要求16所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述效应-靶比率为1:1至1:10。

20.根据权利要求1所述的修饰的NK-细胞群体，其中所述修饰的NK-细胞另外表达嵌合抗原受体。