[发明专利]色素沉积皮肤模型及其制造方法、以及用于治疗或预防皮肤的色素沉积的因子的评价方法

说明书

本发明提供一种色素沉积皮肤模型，包含：被接种于第1细胞培养基材上的、包含通过光照射而造成了损伤的成纤维细胞的第1细胞群；以及被应用于上述第1细胞群上的、包含黑素细胞和角质形成细胞的第2细胞群。此外，本发明提供制造色素沉积皮肤模型的方法、和使用了色素沉积皮肤模型的用于治疗或预防皮肤的色素沉积的因子的评价方法。

技术领域

本发明涉及色素沉积皮肤模型以及制造该模型的方法。此外，本发明涉及使用了色素沉积皮肤模型的用于治疗或预防皮肤的色素沉积的因子的评价方法。

背景技术

皮肤为覆盖将生物体内与生物体外的环境分开的体表的器官。皮肤作为物理性屏障起作用，进行守护避免干燥、有害物质向生物体内侵入，发挥对于生命的维持而言不可缺少的作用。

高等脊椎动物的皮肤如果从最外层起进行大致区分则由表皮、真皮、皮下组织的层形成。表皮主要由被称为角质形成细胞(keratinocyte)的细胞构成，在表皮的最深部(基底层)角质形成细胞一边分裂，一边朝向上层向棘层、颗粒层、进而角质层进行分化一边向表面移动，最后变为垢而脱落。

在表皮的基底层存在黑素细胞，通过黑素细胞内的黑素体而生成黑素。所生成的黑素被周围的角质形成细胞摄入。被摄入的黑素随着角质形成细胞的周转而移动到角质层，经约40天而被排出到生物体外。

可以认为皮肤的斑/雀斑等色素沉积的原因是通过激素的异常、紫外线曝露、局部的炎症等，从而由黑素细胞过度地形成黑素、黑素颗粒在表皮基底层的角质形成细胞内沉积等。虽然开发了治疗或预防色素沉积、例如由年龄增长引起的老年性色素斑等的方法、治疗剂(美白剂)，但存在得不到期待的效果，或虽然获得暂时的效果，但具有效果不持续而复发等课题，开发新的治疗法或预防法、治疗剂的需求持续存在。

在那样的状况下，为了开发新的治疗法，代替现有的动物模型，近年来开发并利用了模仿了皮肤的结构及其功能的色素沉积皮肤模型(例如，专利文献1)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特许第6113393号公报

发明内容

发明所要解决的课题

现有的色素沉积皮肤模型在制作的模型间具有色素沉积的偏差，此外，难以长期稳定地培养。作为其原因，除了作为制作方法，在真皮模型上直接接种包含角质形成细胞、黑素细胞的表皮细胞群，因此真皮模型的品质大大影响表皮层形成以外，在将色素沉积皮肤模型进行维持培养的过程中，不能进行将真皮模型、表皮模型分离而变更条件的操作、在不同的真皮模型上转移表皮模型这样的操作，实验范围具有限制。因此，本发明的目的是提供能够稳定地长期培养的新的色素沉积皮肤模型和制造该色素沉积皮肤模型的方法，除此以外在将色素沉积皮肤模型进行培养维持的过程中可以进行单独真皮模型或表皮模型的条件变更、自由转移真皮模型与表皮模型，此外，本发明的目的是提供对使用了新的色素沉积皮肤模型的用于治疗或预防皮肤的色素沉积的因子进行评价的方法。

用于解决课题的方法

本发明者们进行了深入研究，结果发现，通过在包含通过光照射而造成了损伤的成纤维细胞的第1细胞群上，应用包含黑素细胞和角质形成细胞的第2细胞群，可以开发能够稳定地长期培养的色素沉积皮肤模型。即，本发明包含以下发明。

[1]一种色素沉积皮肤模型，包含：

被接种于第1细胞培养基材上的、包含通过光照射而造成了损伤的成纤维细胞的第1细胞群；以及

被应用于上述第1细胞群上的、包含黑素细胞和角质形成细胞的第2细胞群。

[2]根据[1]所述的色素沉积皮肤模型，上述通过光照射而造成了损伤的成纤维细胞是在光敏剂的存在下通过紫外光的照射而造成了损伤的成纤维细胞。