[发明专利]突变型piggyBac转座酶

权利要求书

1.一种piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶包含在SEQ ID NO:2的位置147、176、221、247、429、533和573中一个或多个处的氨基酸取代。

2.根据权利要求1所述的piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶包含在SEQ ID NO:2的位置147、176、221和247中一个或多个处亮氨酸对异亮氨酸的氨基酸取代。

3.根据权利要求1所述的piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶包含在SEQ ID NO:2的位置429、533和573中一个或多个处苏氨酸对丝氨酸的氨基酸取代。

4.根据权利要求1所述的piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶包含在SEQ ID NO:2的位置147、176、221和247中一个或多个处亮氨酸对异亮氨酸的氨基酸取代，和/或在SEQ IDNO:2的位置429、533和573中一个或多个处苏氨酸对丝氨酸的氨基酸取代。

5.根据权利要求4所述的piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶包含以下氨基酸取代中的至少一个：在SEQ ID NO:2的位置147处亮氨酸对异亮氨酸的氨基酸取代，在SEQ ID NO:2的247位置处亮氨酸对异亮氨酸的氨基酸取代，以及在SEQ ID NO:2的位置533处苏氨酸对丝氨酸的氨基酸取代。

6.根据权利要求4所述的piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶包含以下氨基酸取代中的至少两个：在SEQ ID NO:2的位置147处亮氨酸对异亮氨酸的氨基酸取代，在SEQ ID NO:2的位置247处亮氨酸对异亮氨酸的氨基酸取代，以及在SEQ ID NO:2的位置533处苏氨酸对丝氨酸的氨基酸取代。

7.根据权利要求4所述的piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶包含在SEQ ID NO:2的位置147处亮氨酸对异亮氨酸的取代，在SEQ ID NO:2的位置247处亮氨酸对异亮氨酸的取代，以及在SEQ ID NO:2的位置533处苏氨酸对丝氨酸的取代。

8.根据权利要求1所述的piggyBac转座酶，其中与由用野生型piggyBac转座酶转染或未用piggyBac转座酶转染的细胞表达的相同目的蛋白的滴度相比，由用工程化piggyBac转座酶转染的细胞表达的目的重组蛋白的滴度得到了改善。

9.根据权利要求8所述的piggyBac转座酶，其中该目的重组蛋白是抗原结合蛋白。

10.一种piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶经工程化以增加在宿主细胞中的稳定性，其中该piggyBac转座酶包含在SEQ ID NO:2的位置147、176、221、247、429、533和573中一个或多个处的氨基酸取代。

11.一种piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶具有SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:6、SEQ IDNO:8、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:16的氨基酸序列。

12.一种工程化核酸分子，该核酸分子编码根据权利要求1、10或11中任一项所述的piggyBac转座酶。

13.一种piggyBac转座酶，该piggyBac转座酶由SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5、SEQ IDNO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17或SEQ IDNO:18的核酸序列编码。