[发明专利]使用凋亡抗性细胞系产生多肽的方法在审
| 申请号： | 201980084601.6 | 申请日： | 2019-12-19 |
| 公开（公告）号： | CN113631714A | 公开（公告）日： | 2021-11-09 |
| 发明（设计）人： | T·A·阿瑞纳;A·W·黄 | 申请（专利权）人： | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/67 | 分类号： | C12N15/67;C07K14/47;C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人： | 岑晓东 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 使用 抗性 细胞系 产生 多肽 方法 | ||
1.一种产生重组多肽的方法，其包括：
在适合产生所述多肽的条件下培养HEK293细胞系，所述HEK293细胞系包含(a)人Bax和Bak基因中的每一者中的功能丧失突变以及(b)编码所述重组多肽的多核苷酸。
2.根据权利要求1所述的方法，其中编码所述重组多肽的所述多核苷酸为染色体外多核苷酸。
3.根据权利要求1所述的方法，其中编码所述重组多肽的所述多核苷酸被整合至所述HEK293细胞系的染色体中。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述重组多肽为抗体或其抗原结合片段、抗原、酶或疫苗。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述重组多肽为抗体或其抗原结合片段。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述细胞系在7天内以约650mg/L的效价产生所述重组多肽。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其进一步包括从所述细胞系分离所述重组多肽。
8.一种产生病毒载体的方法，其包括：
在适合产生所述病毒载体的条件下培养HEK293细胞系，所述HEK293细胞系包含(a)人Bax和Bak基因中的每一者中的功能丧失突变；(b)病毒基因组；以及(c)一种或多种编码病毒衣壳的多核苷酸。
9.根据权利要求8所述的方法，其进一步包括从所述细胞系分离所述病毒载体。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中在细胞培养基中培养所述细胞系。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中在介于约6.7与约7.3之间的pH培养所述细胞系。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中在约30％的溶解氧(DO)设定点培养所述细胞系。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中在赋予约13W/m3的功率输入/体积(P/V)的搅拌速率培养所述细胞系。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中以至少约10L的体积培养所述细胞系。
15.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中以至少约25L的体积培养所述细胞系。
16.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中在35L生物反应器培养物中培养所述细胞系。
17.根据权利要求16所述的方法，其包括在35L生物反应器培养物中培养所述细胞系60天。
18.根据权利要求17所述的方法，其中在35L生物反应器培养物中培养所述细胞系60天之后，所述细胞系维持至少85％细胞存活率。
19.根据权利要求16至18中任一项所述的方法，其中在所述35L生物反应器培养物中以介于约20L与约35L之间的工作体积培养所述细胞系。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中在分批饲喂培养条件下培养所述细胞系。
21.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中在灌流培养条件下培养所述细胞系。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于豪夫迈·罗氏有限公司，未经豪夫迈·罗氏有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201980084601.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
