[发明专利]降低血红蛋白A1c测定中的英脱利匹特/脂血干扰的浊度归一化算法和方法

权利要求书

1.测量生物样品中的%糖化血红蛋白或糖化血红蛋白:总血红蛋白比率的方法，所述方法包括以下步骤：

(i) 测量含有裂解的红血细胞的生物样品中在第一波长和第二波长处的吸光度，和基于在这两个波长处获得的测量值确定总血红蛋白浓度tHb，其中所述第一波长是658 nm，且其中所述第二波长在约689 nm至约699 nm的范围内；

(ii) 测量含有裂解的红血细胞的生物样品中在第三波长和第四波长处的吸光度，和基于在这两个波长处获得的测量值确定糖化血红蛋白浓度A1c，其中所述第三波长是658nm，且其中所述第四波长在约785 nm至约825 nm的范围内；

(iii) 利用步骤(ii)中在第四波长处测量的吸光度cHb和浊度归一化算法，将(i)中计算的总血红蛋白浓度归一化，以从(i)的波长测量值基本上除去任何浊度干扰，其中在最高达约1000 mg/dL的英脱利匹特浓度下，将任何浊度干扰基本上降低至小于+/-约5%，且其中所述浊度归一化算法为：归一化tHb = 1.03 X tHb – cHb X 0.7899，其中tHb以μmol/L计；和

(iv) 基于(ii)和(iii)中计算的浓度计算%糖化血红蛋白或糖化血红蛋白:总血红蛋白比率。

2.权利要求1的方法，其中所述生物样品是裂解的全血样品。

3.权利要求1的方法，其中所述步骤在单个反应比色皿中进行。

4.权利要求1的方法，其中所述第二波长是694 nm，且所述第四波长是805 nm。

5.测量生物样品中的%糖化血红蛋白或糖化血红蛋白:总血红蛋白比率的方法，所述方法包括以下步骤：

(a) 裂解所述生物样品中存在的红血细胞；

(b) 使裂解的红血细胞与试剂反应以将血红蛋白氧化成高铁血红蛋白；

(c) 用蛋白酶从血红蛋白β链切割N-末端果糖基二肽片段；

(d) 将高铁血红蛋白转化为叠氮化物-高铁血红蛋白；

(e) 测量第一波长和第二波长处的吸光度，和基于在这两个波长处获得的测量值确定总血红蛋白浓度tHb，其中所述第一波长是658 nm，且其中所述第二波长在约689 nm至约699 nm的范围内；

(f) 使N-末端果糖基肽片段与试剂反应以生成过氧化氢；

(g) 测量第三波长和第四波长处的吸光度，和基于在这两个波长处获得的测量值确定糖化血红蛋白浓度A1c，其中所述第三波长是658 nm，且其中所述第四波长在约785 nm至约825 nm的范围内；

(h) 利用步骤(g)中在第四波长处测量的吸光度cHb和浊度归一化算法，将步骤(e)中计算的总血红蛋白浓度归一化，以从步骤(e)的波长测量值基本上除去任何浊度干扰，其中所述浊度归一化算法是：归一化tHb = 1.03 X tHb – cHb X 0.7899，其中tHb以μmol/L计；和

(i) 基于步骤(g)和(h)中计算的浓度计算%糖化血红蛋白或糖化血红蛋白:总血红蛋白比率。

6.权利要求5的方法，其中所述生物样品是全血样品。

7.权利要求5的方法，其中步骤(a)-(g)在单个反应比色皿中进行。

8.权利要求5的方法，其中所述第二波长是694 nm，且所述第四波长是805 nm。

9.权利要求5的方法，其中用于在步骤(b)中将血红蛋白氧化成高铁血红蛋白的试剂是亚硝酸钠。

10.权利要求5的方法，其中在步骤(d)中，在叠氮化钠存在的情况下将高铁血红蛋白转化为叠氮化物-高铁血红蛋白。

11.权利要求5的方法，其中步骤(f)中使用的试剂是果糖基肽氧化酶。