[发明专利]降低血红蛋白A1c测定中的英脱利匹特/脂血干扰的浊度归一化算法和方法

说明书

公开了分光地测量生物样品中的%糖化血红蛋白或糖化血红蛋白:总血红蛋白比率的方法。所述方法包括使用浊度归一化算法来归一化从光谱测量值计算的总血红蛋白浓度，以从其中基本上除去任何浊度干扰。浊度归一化消除了用英脱利匹特/脂血观察到的负偏差，且因此提供了不受英脱利匹特/脂血的显著干扰的糖化血红蛋白测定。

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不适用。

背景

存在于红血细胞中的血红蛋白可以通过将葡萄糖分子非酶促地添加至血红蛋白的β-链的氨基末端而被糖化。一旦血红蛋白分子被糖化，它就保持糖化，并且红细胞内糖化血红蛋白的积累反映细胞在其生命周期期间已经暴露的平均葡萄糖水平。因此，个体血液中存在的糖化血红蛋白水平与血液中的葡萄糖水平成正比，并且是个体在先前四周至三个月内的平均每日血液葡萄糖浓度的指标。因此，全血样品中糖化血红蛋白与总血红蛋白的比率在具有糖尿病的患者的诊断和监测中是相当有用的。

血液葡萄糖的精确控制可以改善许多与糖尿病相关的发病率和死亡率。因此，基于血红蛋白的物理和化学特性或基于其特异性抗体识别的表位，已经开发了许多不同的血红蛋白的测定法。临床研究已经显示，HbA1c结果改进决策、患者依从性和预后(Thaler等人(1999) Diabetes Care, 22:1415-1421; 和Miller等人(2003) Diabetes Care, 26:1158-1163)。

糖化血红蛋白(HbA1c)通过血红蛋白A的β-链的N-末端的非酶促糖化形成。HbA1c的测量被用作诊断和监测具有糖尿病的患者中的长期血液葡萄糖控制的辅助手段，并用作鉴定处于发展糖尿病的风险中的患者的辅助手段。HbA1c水平反映先前时段(近似8-12周，取决于个体)内的平均葡萄糖浓度，并且比血液和尿液葡萄糖测定提供了更好的长期血糖控制指标。研究已经显示，HbA1c水平的长期控制可以降低由糖尿病引起的慢性并发症的发展和进展的风险。

免疫测定法是目前在临床实验室环境中使用的最常见类型的血红蛋白测定方法。这些免疫测定法利用这样的抗体，其识别血红蛋白表位，并且在特定情况下识别糖化血红蛋白(HbA1c)的表位，诸如(但不限于)其N-末端糖化氨基酸的至少一部分。例如，针对分析物HbA1c的比浊抑制免疫测定法(TINIA)利用抗HbA1c抗体和多半抗原凝集剂(即，含有多个HbA1c表位以引起与游离抗体凝集的合成分子)。然而，不完全分散的多半抗原试剂是该测定法的主要干扰，因为其基本上模拟不溶性抗体-多半抗原复合物；不完全分散的多半抗原试剂引起光散射，随后比浊测量所述光散射，并且由于吸光度和分析物浓度之间的反比关系，所述光散射因此转化为错误的低HbA1c值。

光谱方法也用于血红蛋白测定；然而，生物样品内脂质的存在可以在这些方法中利用的一种或多种波长处引起干扰。因此，需要新的和改进的血红蛋白A1c测定，其利用光谱方法并且没有观察到来自英脱利匹特/脂血的显著干扰。

附图简述

图1图示说明使用掺以英脱利匹特的全血样品，在Atellica CH临床化学分析仪(Siemens Healthineers, Tarrytown, NY)上获得的%糖化血红蛋白(% A1c)相比于英脱利匹特浓度(mg/dL)的结果。

图2图示说明使用掺以英脱利匹特的全血(6.5% HbA1c)获得的%偏差相比于英脱利匹特浓度(mg/dL)的结果。

图3图示说明使用掺以英脱利匹特的全血(8.0% HbA1c)获得的%偏差相比于英脱利匹特浓度(mg/dL)的结果。

图4图示说明使用英脱利匹特掺加的全血(6.5%和8% HbA1c)获得的A1c (µmol/L)相比于英脱利匹特浓度(mg/dL)的结果。