[发明专利]产生优特克单抗的方法

说明书

本发明描述了制造具有目标水平的一种或多种聚糖的优特克单抗产物的方法。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年12月31日提交的美国临时申请62/786,821的权益，该临时申请据此全文以引用方式并入。

序列表

本申请包含序列表，该序列表已经以ASCII格式电子提交并且据此全文以引用方式并入。所述ASCII副本创建于2019年12月20日，命名为M0168PCT_SL.txt，大小为6,036字节。

背景技术

治疗性抗体是一类重要的治疗性生物产品。抗体糖基化和聚糖组成可以影响抗体活性和效应子功能。仍然持续需要用于控制抗体产物的聚糖谱的改进方法。

发明内容

本公开提供了用于产生(例如制造)具有目标水平的一种或多种聚糖的优特克单抗的过程手段。本公开提供了以下见解：培养基中的半乳糖浓度与培养时间之间的关系可以用作控制培养物中优特克单抗的一种或多种聚糖(例如半乳糖基化)的目标水平的过程手段。本公开鉴定了在控制一种或多种聚糖(例如半乳糖基化)的目标水平中，培养时间与培养基中的半乳糖浓度之间的逆相关。

在特定方面，本公开提供了制造具有目标水平的一种或多种聚糖的优特克单抗的方法。此类方法可包括提供(例如，产生、表达(例如，在小规模或大规模细胞培养中)和/或制造)或获得(例如，从第三方(包括合同相关的第三方或非合同相关的(例如独立的)第三方)接受和/或购买)优特克单抗测试蛋白质(例如优特克单抗药物，例如优特克单抗药物的制剂，例如一批测试优特克单抗药物)。

在某些情况下，本公开提供了制造包含具有目标水平的一种或多种聚糖的优特克单抗的药物组合物的方法，该方法包括：选择半乳糖水平和细胞培养时间，其中半乳糖水平和时间是逆相关的；在包括所选择的半乳糖水平和时间的条件下，培养经遗传工程化以表达优特克单抗的细胞群；收获由细胞群表达的优特克单抗，从而产生优特克单抗的制剂；以及如果制剂满足一种或多种聚糖的目标水平，则纯化、浓缩和/或配制优特克单抗制剂，以产生包含优特克单抗的药物组合物。在一些实施方案中，一种或多种聚糖的目标水平是选自G0F、唾液酸化聚糖和G2F的聚糖的目标水平。在一些实施方案中，一种或多种聚糖的目标水平是G0F的目标水平。

在某些情况下，本公开提供了制造包含具有目标水平的G0F聚糖的优特克单抗的药物组合物的方法，该方法包括：选择G0F聚糖的目标水平；选择半乳糖水平和细胞培养时间以提供所选择的G0F的目标水平，其中半乳糖水平和时间是逆相关的；在包括所选择的半乳糖水平和时间的条件下，培养经遗传工程化以表达优特克单抗的细胞群；收获由细胞群表达的优特克单抗，从而产生优特克单抗的制剂；以及如果制剂满足G0F聚糖的目标水平，则纯化、浓缩和/或配制优特克单抗制剂，以产生包含优特克单抗的药物组合物。

在某些情况下，本公开提供了产生具有目标水平的一种或多种聚糖的优特克单抗药物产品的方法，该方法包括：在一定条件下培养经遗传工程化以表达优特克单抗的细胞群，其中该条件的特征在于包括所选择的半乳糖水平和细胞培养时间在内的参数，并且其中半乳糖水平和时间是逆相关的；收获由细胞表达的优特克单抗，从而产生优特克单抗制剂；以及如果优特克单抗制剂满足一种或多种聚糖的目标水平，则纯化、浓缩和/或配制优特克单抗制剂以产生优特克单抗药物产品。在一些实施方案中，一种或多种聚糖的目标水平是选自G0F、唾液酸化聚糖和G2F的聚糖的目标水平。在一些实施方案中，一种或多种聚糖的目标水平是G0F的目标水平。

在一些实施方案中，所提供的方法包括培养经遗传工程化以表达优特克单抗的哺乳动物细胞群。在一些实施方案中，哺乳动物细胞选自：CHO细胞、HEK 293细胞、纤维肉瘤HT1080细胞、PER.C6细胞、CAP细胞、HKB-11细胞、HuH-7细胞、NS0细胞和SP 2/0细胞。