[发明专利]细胞内的化合物的动态分析法在审

专利信息
申请号: 201980091053.X 申请日: 2019-02-26
公开(公告)号: CN113396225A 公开(公告)日: 2021-09-14
发明(设计)人: 神田胜弘;大床国世;甲斐章嗣 申请(专利权)人: 株式会社日立高新技术
主分类号: C12Q1/02 分类号: C12Q1/02
代理公司: 北京银龙知识产权代理有限公司 11243 代理人: 金鲜英;陈彦
地址: 日本*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 细胞内 化合物 动态 分析
【权利要求书】:

1.一种化合物动态分析方法,其为使用细胞的化合物动态分析方法,

包括:在容纳有含有对象化合物的细胞的容器中添加第1缓冲液,将所述容器内的温度调节至第1温度并保温,并且将所述容器内的温度调节至比所述第1温度低的第2温度的CE工序;

在所述CE工序中,隔开间隔t1地测定所述第1缓冲液中所述化合物的量S和S’,

基于所述量S和S’以及所述间隔t1算出所述化合物从所述细胞的基底/基底外侧面的排出速度。

2.根据权利要求1所述的化合物动态分析方法,

包括:

分别在各自容纳有含有所述化合物的细胞的第1容器、第2容器和第3容器中实施所述CE工序,分别从所述第1容器、所述第2容器和所述第3容器回收所述第1缓冲液的CE终止工序,以及

所述CE终止工序之后,在所述第1容器中添加含有解除细胞间黏附的试剂的第2缓冲液,将所述第1容器内的温度调节至第3温度并保温的EA1工序;

在所述EA1工序中,隔开间隔t2地测定所述第2缓冲液中所述化合物的量B1和B1’;

基于所述量B1和B1’以及所述间隔t2算出所述化合物从所述细胞的基底/基底外侧面和顶面的排出速度。

3.根据权利要求2所述的化合物动态分析方法,

包括:所述CE终止工序之后,在所述第2容器中添加第3缓冲液,将所述第2容器内的温度调节至所述第3温度并保温的EA2工序;

在所述EA2工序中,隔开所述间隔t2地测定所述第3缓冲液中所述化合物的量B2和B2’,

基于所述量B2和B2’以及所述间隔t2算出所述化合物从所述细胞的基底/基底外侧面的排出速度。

4.根据权利要求3所述的化合物动态分析方法,基于所述量B1和B1’以及B2和B2’、所述间隔t2,算出所述化合物从所述细胞的顶面的排出速度。

5.根据权利要求3所述的化合物动态分析方法,

包括:所述CE终止工序之后,在所述第3容器中添加所述第3缓冲液,将所述第3容器内的温度调节至比所述第3温度低的第4温度并保温的EA3工序;

在所述EA3工序中,隔开所述间隔t2地测定所述第3缓冲液中所述化合物的量B3和B3’,

基于所述量B3和B3’以及所述间隔t2算出所述化合物通过被动扩散从所述细胞的基底/基底外侧面的排出速度。

6.根据权利要求5所述的化合物动态分析方法,

基于所述量B2和B2’以及B3和B3’、所述间隔t2,算出所述化合物通过转运蛋白途径从所述细胞的基底/基底外侧面的排出速度。

7.根据权利要求1所述的化合物动态分析方法,

包括:

分别在各自容纳有含有所述化合物的细胞的第1容器、第2容器和第3容器中实施所述CE工序,分别从所述第1容器、所述第2容器和所述第3容器回收所述第1缓冲液的CE终止工序,以及

所述CE终止工序之后,在所述第2容器中添加第3缓冲液,将所述第2容器内的温度调节至第3温度并保温的EA2工序;

在所述EA2工序中,隔开间隔t2地测定所述第3缓冲液中所述化合物的量B2和B2’,

基于所述量B2和B2’以及所述间隔t2算出所述化合物从所述细胞的基底/基底外侧面的排出速度。

8.根据权利要求1所述的化合物动态分析方法,

包括:

分别在各自容纳有含有所述化合物的细胞的第1容器、第2容器和第3容器中实施所述CE工序,分别从所述第1容器、所述第2容器和所述第3容器回收所述第1缓冲液的CE终止工序,以及

所述CE终止工序之后,在所述第3容器中添加第3缓冲液,将所述第3容器内的温度调节至比第3温度低的第4温度并保温的EA3工序;

在所述EA3工序中,隔开间隔t2地测定所述第3缓冲液中所述化合物的量B3和B3’,

基于所述量B3和B3’以及所述间隔t2算出所述化合物通过被动扩散从所述细胞的基底/基底外侧面的排出速度。

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