[发明专利]一种生产3-氨基异丁酸的酶突变体有效
申请号: | 201980101160.6 | 申请日: | 2019-11-27 |
公开(公告)号: | CN114729016B | 公开(公告)日: | 2022-12-13 |
发明(设计)人: | 廖琪林;张健 | 申请(专利权)人: | 南京纽邦生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415 |
代理公司: | 南京华讯知识产权代理事务所(普通合伙) 32413 | 代理人: | 刘怡彣;王文岩 |
地址: | 210000 江苏省南京市鼓楼区*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 氨基 丁酸 突变体 | ||
1.一种甲基转移酶突变体C24MTgm-M11,其特征在于,所述酶突变体源自序列为SEQ IDNO:1的野生型酶C24MTgm,其中135位置的脯氨酸被丙氨酸取代,136位置的亮氨酸被丙氨酸代替,213位置的苯丙氨酸被丝氨酸取代;所述甲基转移酶突变体其氨基酸序列为SEQ IDNO:3。
2.一种甲基转移酶突变体C24MTgm-M11,其特征在于,编码酶突变体C24MTgm-M11的多核苷酸其核酸序列为SEQ ID NO:4。
3.一种甲基转移酶突变体的表达载体,其特征在于,包括权利要求2所述的多核苷酸。
4.根据权利要求3所述的表达载体,其特征在于,所述载体为pSU-lacIqTrc-C24MTgm-M11质粒,其包括权利要求2的多核苷酸。
5.一种宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包括权利要求3或4的表达载体。
6.根据权利要求5所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌MG1655,所述MG1655其基因修饰为ΔptsGΔfumACΔfumB,panD,aspA,C24MTgm-M11。
7.一种权利要求1所述的甲基转移酶突变体C24MTgm-M11的应用,所述应用为生产3-氨基异丁酸。
8.一种权利要求3所述表达载体的应用,所述应用为生产3-氨基异丁酸。
9.一种权利要求5所述宿主细胞的应用,所述应用为生产3-氨基异丁酸。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌MG1655,所述MG1655其基因修饰为ΔptsGΔfumACΔfumB,panD,aspA,C24MTgm-M11。
11.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述生产3-氨基异丁酸的方法为发酵。
12.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:将权利要求6的宿主细胞接种到培养基中,然后添加葡萄糖为基质,并通过宿主细胞转化形成3-氨基异丁酸。
13.根据权利要求11所述的应用,其特征在于,所述发酵的培养基由以下成分组成:硫酸铵15g/L、磷酸二氢钾5.0g/L、十二水磷酸氢二钠15g/L、七水硫酸镁1.0g/L、酵母萃取物1.0g/L、葡萄糖20g/L、pH值7.0。
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