[发明专利]一种用气相色谱-氮化学发光检测法测定烤烟中丁香酚和异丁香酚的方法

说明书

本发明公开了一种用气相色谱‑氮化学发光检测法测定烤烟中丁香酚与异丁香酚的方法。本发明建立了一种简单、快速的GC—NCD法测定新鲜烟叶中丁香酚与异丁香酚的残留分析方法。烟草样品中的丁香酚和异丁香酚用0.01‑0.03mol/L的乙酸水溶液(pH=3.0‑4.0)提取，经强阳离子交换固相萃取柱净化后用GC—NCD测定。方法的准确度、精密度和检出限均可满足烟草中丁香酚和异丁香酚的分析要求，重现性好，操作简便，且适合于大批量样品的检测分析。

技术领域

本发明属于本发明涉及烟草和化学技术领域，具体涉及一种用气相色谱-氮化学发光检测法测定烤烟中的丁香酚和异丁香酚的方法。

背景技术

多酚类物质是烟草香味的重要成分，又是一些热解物的前体。烟草中有许多含酚基的化合物。这些物质与烟叶的颜色、香味和烟气的生理强度关系都很大。烟叶中的酚有简单酚，如丁香酚、异丁香酚等，多属于烟叶中芳香油和树脂等类物质的成分，对烟叶香味有利。

卷烟在燃烧过程中，发生了蒸馏、干馏、热解、合成、冷凝等多种物理和化学反应，形成大量新生化合物，丁香酚和异丁香酚在卷烟主流烟气中的含量采用何种方法进行测定，相关文献报道较少，截至目前，尚未发现国内外有采用气相色谱-氮化学发光检测法测定烤烟中丁香酚和异丁香酚含量的任何专利和文献报道。而且，烟气成分非常复杂，基质干扰严重，丁香酚和异丁香酚在烤烟中的含量又较低，已经建立的烟气中酚类化合物的检测方法能否适用于烤烟中丁香酚和异丁香酚的测定尚未可知。

因此，建立一种能够快速、准确、分离效果好、灵敏度高的烤烟中丁香酚和异丁香酚含量的检测方法，是烟草行业当前的一项迫切任务，对于研究和评价吸烟与健康问题也具有十分重要和迫切的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种前处理简单、分离效果好、定性准确、样品分析时间短、检测灵敏度高的烤烟中丁香酚和异丁香酚的气相色谱-氮化学发光检测法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现： 用气相色谱-氮化学发光检测法测定烤烟中丁香酚和异丁香酚的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）样品前处理：称取研磨至糊状的鲜烟叶2-5 g于50 mL塑料离心管中，加人15-30 mL0.01-0.03 mol/L的乙酸水溶液(pH=3.0-4.0)，涡旋30-50S后振荡提取30-50min，经4000-5000 r/min离心后取上清液；再分别用8-15mL上述乙酸水溶液洗涤残渣2-5次，合并滤液过0.45-0.90μm水相滤膜，待净化；

（2）用0.5-0.8mol/L的盐酸调节滤液至pH=2.0-3.0左右,依次用甲醇、水各5-10mL预淋洗经强阳离子交换固相萃取柱，将滤液转移至萃取柱中，用 5-10mL0.5-1.0mol/L的盐酸洗涤残余物后一并过柱，依次用0.5-1.0 mol/L的盐酸、甲醇各5-10mL淋洗，弃去淋出液并将小柱抽干，用10-20mL V(氨水)：V(甲醇)= 5-10：95-120的溶液洗脱，收集洗脱液，45-65℃下用氮气吹干。（3）用0.5-1.0mL甲醇溶解分析物，过0.45-0.80μm微孔有机滤膜，转移至250-500μL微量色谱瓶中，待GC分析。（4）GC-NCD分析条件色谱柱为石英毛细管柱DB-1701(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度250-450℃；不分流进样；进样量2-5μL。程序升温： 初温110-150℃，保持1-3min；以8-15℃/min升至230-250℃，保持5-10 min；以10-15℃/min升至260-300℃，保持4-8min。载气为氦气，流量为1.5-3.0mL/min；检测器：基座温度250℃，氢气流量4.0-8.0 mL/min，氧气流量10-20mL/min，裂解温度为950-1050℃，采集数据频率为20-35Hz。