[发明专利]一种长链RNA Lnc-2193及其应用有效
申请号: | 202010000900.1 | 申请日: | 2020-01-02 |
公开(公告)号: | CN111019949B | 公开(公告)日: | 2021-01-15 |
发明(设计)人: | 杨彩侠;杜志强;王沛超 | 申请(专利权)人: | 长江大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/11;C12Q1/6888;C12Q1/6851 |
代理公司: | 武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙) 42231 | 代理人: | 江慧 |
地址: | 434023*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 rna lnc 2193 及其 应用 | ||
1.一种长链RNA Lnc-2193,其特征在于,所述长链RNA Lnc-2193基因的转录本序列为序列表中SEQ ID NO:1-6所示的核苷酸序列中的任一条;或者是与序列表中SEQ ID NO:1-6任一条所示的序列经硫代修饰或/和甲氧基修饰得到的核苷酸序列。
2.权利要求1所述的长链RNA Lnc-2193在调控猪卵母细胞成熟和发育能力中的应用。
3.如权利要求1所述的长链RNA Lnc-2193作为分子标志物在检测猪卵母细胞成熟状况中的应用。
4.一种长链RNA Lnc-2193基因的siRNA,其特征在于,其核苷酸序列为SEQ ID NO:9-10所示的核苷酸序列中的任一条。
5.一种长链RNA Lnc-2193基因的荧光定量PCR检测引物对,其特征在于,包括:
上游引物,如SEQ ID NO:7所示的核苷酸序列;
下游引物,如SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列。
6.一种长链RNA Lnc-2193基因的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,包括:权利要求5所述的荧光定量PCR检测引物对。
7.如权利要求6所述的荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于,还包括RNA提取试剂、反转录反应体系和荧光定量PCR反应体系,所述荧光定量PCR反应体系包括SYBR GreenMaster、ddH2O、所述反转录得到的cDNA以及权利要求5所述的检测引物对。
8.一种权利要求6-7任一所述的荧光定量PCR检测试剂盒的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1、提取待检测样品中的RNA,然后进行反转录得到cDNA;
步骤2、利用权利要求5中所述的引物对,对待检测样品cDNA进行荧光定量PCR扩增,采用2-ΔΔCT方法计算并获得不同来源卵泡样本中长链RNA Lnc-2193基因的相对表达量;
步骤3、根据PCR扩增产物及基因相对表达量判断待检测样本是否存在猪长链RNA Lnc-2193基因及其表达情况。
9.如权利要求8所述的使用方法,其特征在于,所述步骤2中的荧光定量PCR反应条件为,50℃2min、95℃10min、95℃15s、60℃、60s,40个循环。
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