[发明专利]一种长链RNA Lnc-2193及其应用

说明书

本发明提供了一种长链RNA Lnc‑2193及其应用。所述长链RNA Lnc‑2193基因的转录本序列为序列表中SEQ ID NO：1‑6所示的核苷酸序列中的任一条；本发明还提供了所述长链RNA Lnc‑2193的荧光定量PCR检测引物对及检测试剂盒，所述检测引物对为如SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示的核苷酸序列；本发明首次发现了所述长链RNA Lnc‑2193有促进猪卵母细胞成熟和发育的作用，可以作为改善猪卵母细胞成熟并提高卵母细胞质量的靶点，促进体外生产更多、更好的胚胎，在猪常规育种、地方品种的保种和扩繁方面具有很好的应用前景。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种长链RNA Lnc-2193及其应用。

背景技术

猪是重要的经济动物，也是生物医学模型动物，其生殖调控研究既可以为人类生殖生理和病理过程研究提供参考，又可以为提高猪的繁殖性能提供理论依据。然而，繁殖力低下是目前困扰我国养猪业生产的一个难题。猪繁殖力低下体现在各个阶段，包括卵减数分裂成熟率低、受精后早期胚胎发育率低、妊娠率及活仔率低下等。其中，猪卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中的高比率损失已成为一个重要问题。猪生发泡期(GV期)卵经体外成熟培养，只有60％-70％可以达到第二次减数分裂中期阻滞阶段(metaphase II，MII)。MII期卵母细胞体外受精后只有20-30％可以发育到囊胚阶段。哺乳动物卵母细胞减数分裂成熟后的数量影响早期胚胎的数量，成熟卵母细胞的质量影响早期胚胎发育率和后期胎儿的全程发育。

lncRNA是RNA聚合酶II转录而来的RNA分子，长度大于200nt，定位于细胞核或细胞质内，不具备编码蛋白的能力，以RNA的形式调控基因的表达，并参与细胞内多种过程调控过程。近年来研究表明，lncRNA可以在表观遗传学修饰、基因的转录调控、转录后调控和翻译后调控四个不同层面上经多种作用方式调控基因表达。相比于编码蛋白的基因和小的调控RNA，lncRNA的研究还只是处于起步阶段。然而，lncRNA所展现出的众多分子生物学功能和作用，表明了其重要的调控功能。因此，鉴定不同物种中的更多种lncRNA，并阐明重要lncRNA在不同和特定生物过程中的调控机理是十分重要的。lncRNA在猪繁殖方面研究较少，尤其在卵和胚胎生物学上鲜有报道。

然而目前关于猪组织特异性lncRNA的研究尤其是猪卵泡lncRNA及其调控机制的研究尚未见报道。因此，迫切需要发现猪卵母细胞成熟和发育能力的lncRNA调控方法，有助于提高优质成熟卵母细胞的数量和质量，并进一步提高猪的保种/育种和扩繁撑。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的研究空白，提供了一种长链RNA Lnc-2193及其应用。

为实现上述目的，本发明通过以下方案实现：

在本发明的第一方面，提供了一种长链RNA Lnc-2193，所述长链RNA Lnc-2193基因的转录本序列为序列表中SEQ ID NO：1-6所示的核苷酸序列中的任一条；或者是与序列表中SEQ ID NO：1-6任一条所示的序列具有80％以上同源性的核苷酸序列；或者是与序列表中SEQ ID NO：1-6任一条所示的序列经硫代修饰或/和甲氧基修饰得到的核苷酸序列。

本发明的长链RNA Lnc-2193是申请人选择长白猪卵巢为实验材料，利用高通量测序技术和生物信息学方法，筛选鉴定出一种在卵母细胞中表达的长链非编码RNA分子。申请人将其命名为猪长链RNA Lnc-2193。所述lncRNA2193位于猪15号染色体上，存在6个剪切转录本，其序列分别为SEQ ID NO.1-6所示。

在本发明的第二方面，提供了所述的长链RNA Lnc-2193在改善猪卵母细胞成熟和发育能力中的应用。