[发明专利]一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒

权利要求书

1.一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒，其特征在于试剂盒由胚胎漂洗液、胚胎固定液、透膜液、封闭液、阴性对照、初级抗体、二级抗体、细胞核染色液及制片液9种特殊试剂组成，是辅助生殖技术质量控制的重要评估手段。

2.根据权利要求1所述的一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒所述的9种试剂；其特征在于，其中的胚胎漂洗液的组份是：125-145毫摩尔氯化钠（NaCl）、2.0-3.0 毫摩尔氯化钾（KCl）、8-12 毫摩尔磷酸氢二钠（Na₂HPO₄）、1.0-2.0 毫摩尔磷酸二氢钾（KH₂PO₄）、0.01-0.04%(体积/体积)聚山梨酯（TWEEN-20）和水;其pH值（酸碱度）为6.8–7.8。

3.根据权利要求1所述的一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒所述的9种试剂；其特征在于，其中的胚胎固定液的组份是：125-145毫摩尔氯化钠、2.0-3.0毫摩尔氯化钾、8-12毫摩尔磷酸氢二钠、1.0-2.0 毫摩尔磷酸二氢钾、1-5 %（重量/体积）多聚甲醛(Paraformaldehyde, PFA）和水; pH值为 7.0-7.8。

4.根据权利要求1所述的一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒所述的9种试剂；其特征在于，其中的透膜液的组份是：125-145毫摩尔氯化钠、2.0-3.0 毫摩尔氯化钾、8-12毫摩尔磷酸氢二钠、1.0-2.0 毫摩尔磷酸二氢钾、1-5 %（重量/体积）多聚甲醛Paraformaldehyde, PFA）、0.1-0.5%(体积/体积)TWEEN-20和0.1-0.4%(体积/体积)聚乙二醇对-（1,1,3,3-四甲基丁基）-苯基醚（TRITON X100）和水。

5.根据权利要求1所述的一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒所述的9种试剂；其特征在于，其中的封闭液是125-145毫摩尔氯化钠、2.0-3.0毫摩尔氯化钾、8-12毫摩尔磷酸氢二钠、1.0-2.0毫摩尔磷酸二氢钾、1-4 % (重量/体积)牛血清白蛋白(BSA)，10-40%（体积/体积)与二级抗体同源的血清和水组成。

6.根据权利要求1所述的一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒所述的9种试剂；其特征在于，其中的阴性对照的组份是：125-145毫摩尔氯化钠、2.0-3.0 毫摩尔氯化钾、8-12毫摩尔磷酸氢二钠、1.0-2.0 毫摩尔磷酸二氢钾、1-4% (重量/体积)牛血清白蛋白 (BSA)、与初级抗体同源同浓度的免疫球蛋白和水。

7.根据权利要求1所述的一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒所述的9种试剂；其特征在于，其中所述的的初级抗体组份是125-145毫摩尔氯化钠、2.0-3.0毫摩尔氯化钾、8-12毫摩尔磷酸氢二钠、1.0-2.0毫摩尔磷酸二氢钾、1-4%(重量/体积) 牛血清白蛋白(BSA)和水，加上1-10微克/毫升的初级抗体。

8.根据权利要求7所述的一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒所述的9种试剂,其中所述的的初级抗体所含的初级抗体可以是任何一种特异性识别囊胚内细胞团细胞的抗体；如：1）抗NANOG；2)抗UTF1和3）抗OCT3/4等。

9.根据权利要求1所述的一种辅助生殖技术用鼠胚试验囊胚细胞染色和计数试剂盒所述的9种试剂；其特征在于，所述的二级抗体组份是125-145毫摩尔氯化钠、2.0-3.0 毫摩尔氯化钾、8-12毫摩尔磷酸氢二钠、1.0-2.0 毫摩尔磷酸二氢钾、1-4%(重量/体积)牛血清白蛋白(BSA)和水，加上1：100 - 1：500偶联荧光标记的抗初级抗体的二级抗体。