[发明专利]一种卵细胞激活培养液及其使用方法

说明书

本发明提供了一种卵细胞激活培养液及其使用方法，所述卵细胞激活培养液由基础培养液和以下浓度的组分组成：钙离子载体1‑10μmol/L；褪黑素0.01‑100nmol/L；辅酶Q10 0.5‑2.0mg/L；IGF‑2 0.1‑300nmol/L；人血清白蛋白1‑10g/L。上述卵细胞激活培养液能有效弥补精卵结合时的卵子激活缺陷，诱导减数分裂正常进行、雌雄原核形成以及胚胎和胎儿的进一步发育。

技术领域

本发明涉及辅助生殖技术领域，具体涉及一种卵细胞激活培养液及其使用方法。

背景技术

辅助生殖技术是人类辅助生殖技术(Assisted Reproductive Technology，ART)的简称，指采用医疗辅助手段使不育夫妇妊娠的技术，包括人工授精(ArtificialInsemination，AI)和体外受精-胚胎移植(In Vitro Fertilization and EmbryoTransfer，IVF-ET)及其衍生技术两大类。其中，体外受精-胚胎移植(IVF-ET),是指将患者双方的卵子与精子取出后，在体外进行受精，然后再将受精卵或者胚胎移植回母体子宫内发育成胎儿。

卵母细胞通过成熟促进因子(matur-ation promoting factor,MPF)和细胞生长抑制因子(cytostatic factor,CSF)的调节作用，使发育停滞在第二次减数分裂中期，即MII期；当受精时，卵母细胞胞质内Ca²⁺浓度瞬间升高形成钙波，钙波之后紧随一系列重复的Ca²⁺振荡，这种钙振荡可以破坏CSF，导致MPF活性降低甚至消失，引起卵母细胞内的各种代谢活动重新活跃，这个过程被称为卵子激活，促使卵母细胞离开MII期完成减数分裂，形成原核(PN)，释放第二极体(2Pb)，完成受精过程。因此卵子激活决定受精过程能否完成，而胞内钙离子震荡则是卵子激活的一个关键环节。

在辅助生殖技术中约有30％的卵母细胞发生受精失败，其中常规IVF受精失败的主要原因是精子穿透失败，ICSI后受精失败的主要原因是卵母细胞激活不足。

发明内容

基于此，本发明提供一种卵细胞激活培养液及其使用方法，所述卵细胞激活培养液能有效弥补精卵结合时的卵子激活缺陷，诱导减数分裂正常进行、雌雄原核形成以及胚胎和胎儿的进一步发育。

具体技术方案为：

一种卵细胞激活培养液，所述卵细胞激活培养液由基础培养液和以下浓度的组分组成：

在其中一些实施例中，所述卵细胞激活培养液由基础培养液和以下浓度的组分组成：

在其中一些实施例中，所述卵细胞激活培养液由基础培养液和以下浓度的组分组成：

在其中一些实施例中，所述钙离子载体为A23187钙离子载体。

A23187钙离子载体，是通过Ca²⁺通道跨膜转运，触发Ca²⁺内流，使胞内Ca²⁺浓度在短时间内迅速升高，后缓慢下降，促进细胞内的钙振荡。

在其中一些实施例中，所述基础培养液包含以下组分：无机盐缓冲液、葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠、氨基酸、丙氨酰-谷氨酰胺、牛磺酸、四元羧酸乙二胺四乙酸，且所述无机盐缓冲液、葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠、氨基酸、丙氨酰-谷氨酰胺、牛磺酸、四元羧酸乙二胺四乙酸的摩尔比为(94.25-160.4):(0.1-6):(1-22):(0.01-1.1):(0.07-4.2):(0.1-2.2):(0.01-0.6):(0.001-0.05)。