[发明专利]同时检测PAT和OTA的电化学传感器、制备及检测方法

权利要求书

1.同时检测PAT和OTA的电化学传感器，包括工作电极、参比电极和对电极，其特征在于，所述的工作电极表面依次涂覆有AuNPs-BP纳米复合材料层和识别待测物的识别敏感层；所述的AuNPs-BP纳米复合材料层涂覆在工作电极表面，识别敏感层涂覆在AuNPs-BP纳米复合材料层的表面；

所述的识别敏感层包含PAT适体链、PAT互补链、OTA适体链和OTA互补链；

所述的AuNPs-BP纳米复合材料通过如下方法制备得到：

将0.5～5mg/mL的黑鳞分散液与0.05～0.2mM的纳米金溶液按照体积比为3:1混合，室温下反应1～2h，得到AuNPs-BP纳米复合材料。

2.如权利要求1所述的同时检测PAT和OTA的电化学传感器，其特征在于，将氯金酸溶液加热至150℃后加入柠檬酸钠，氯金酸与柠檬酸钠的摩尔浓度比为1:1，反应25min，得到纳米金溶液。

3.如权利要求1所述的同时检测PAT和OTA的电化学传感器，其特征在于，所述的工作电极为玻碳电极、金电极或石墨电极。

4.权利要求1至3任一项所述的电化学传感器的工作电极的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，将权利要求1至3任一项得到的AuNPs-BP纳米复合材料滴涂在工作电极上，室温干燥后得到AuNPs-BP/GCE电极；

步骤2，将第一混合液滴涂到AuNPs-BP/GCE电极表面，室温下孵育2～14h，然后再在表面涂覆6-巯基-1-己醇，室温下反应0.2～2h；

第一混合液包括PAT适体链、OTA互补链、Tris-HCl和TCEP；

步骤3，将第二混合液滴涂到步骤2得到的电极表面，室温下孵育0.2～3h，得到工作电极；

第二混合液包括PAT互补链、OTA适体链和Tris-HCl。

5.如权利要求4所述的电化学传感器的工作电极的制备方法，其特征在于，所述的第一混合液的浓度为0.5μM；第一混合液中PAT适体链为10μM、OTA互补链为10μM、Tris-HCl为0.1M、TCEP为1mM。

6.如权利要求4所述的电化学传感器的工作电极的制备方法，其特征在于，所述的第二混合液的浓度为0.5μM；第二混合液中PAT互补链为10μM、OTA适体链为10μM、Tris-HCl为0.1M。

7.如权利要求4所述的电化学传感器的工作电极的制备方法，其特征在于，所述的工作电极在滴涂AuNPs-BP纳米复合材料前经过预处理，预处理过程为：使用氧化铝浆对工作电极进行抛光,再用乙醇和超纯水混合液超声清洗多次，最后用超纯水超声清洗多次。

8.一种同时检测PAT和OTA的方法，其特征在于，该方法包括：

步骤1，将权利要求1～3任一项所述的电化学传感器作为三电极体系，通过差分脉冲伏安法分别得到PAT浓度与电流的标准曲线以及OTA浓度与电流的标准曲线；

步骤2，根据步骤1得到的标准曲线，对待检测样品中的PAT和OTA定量检测。

9.如权利要求8所述的同时检测PAT和OTA的方法，其特征在于，所述的PAT浓度与电流之间的标准曲线关系为：

△I_PAT＝0.00926lgC_PAT+0.07317或△I_PAT＝0.00568lgC_PAT+0.07385；

所述的OTA浓度与电流之间的标准曲线关系为：

△I_OTA＝-0.03631lgC_OTA-0.38450或△I_OTA＝-0.02702lgC_OTA-0.3933。

其中，C_PAT表示PAT的浓度，单位为pg·mL^-1；△I_PAT表示PAT的电流变化值，单位为μA；C_OTA表示OTA的浓度，单位为pg·mL^-1；△I_OTA表示OTA的电流变化值，单位为μA。