[发明专利]一种YAP1基因修饰的间充质干细胞及其制备方法

权利要求书

1.一种YAP1基因修饰的间充质干细胞，其特征在于，是以过表达YAP1基因修饰的原代间充质干细胞。

2.根据权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述YAP1基因来源于YAP1慢病毒载体或YAP1质粒载体。

3.根据权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述原代间充质干细胞的来源是下述任意一种人体组织：胎盘、脐带或脂肪组织。

4.权利要求1所述YAP1基因修饰的间充质干细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取含有原代间充质干细胞的胎盘、脐带或脂肪组织，剪取小块；在培养皿上用磷酸盐缓冲液清洗至清洗液透明后，充分剪碎；

(2)将剪碎的组织块转移至50毫升离心管内，加入25毫升质量/体积浓度为0.1％的胶原酶Ⅳ，放在37℃恒温的摇床上摇晃消化30分钟；

(3)向消化好的组织中加入20毫升磷酸盐缓冲液，混匀后经100微米筛网过滤；将滤液在1200转/分钟离心5分钟，去上清液保留细胞沉淀；

(4)向细胞沉淀中加入5毫升含有20％胎牛血清的DMEM培养基，混匀后接种至T25培养瓶；然后置于5％CO₂、37℃恒温的培养箱中；每隔3天换一次新鲜的含有20％胎牛血清的DMEM培养基；

(5)待细胞50％汇合后，以感染复数为50∶1加入YAP1慢病毒载体或YAP1质粒载体，转染间充质干细胞；完成转染后得到过表达YAP1基因修饰的原代间充质干细胞YAP1-LV-MSC。