[发明专利]一种载脂蛋白E与盐霉素复合纳米粒及制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种载脂蛋白E与盐霉素复合纳米粒及制备方法和应用，是利用胆酸钠法制备的复合纳米粒，复合纳米粒包括有卵磷脂、胆酸钠、盐霉素和载脂蛋白E，其中卵磷脂与胆酸钠质量比为0.5‑2，盐霉素与载脂蛋白E质量比为0.067‑0.2，盐霉素与PBS总体积的质量体积比为0.083‑0.2，单位为：g/L。其制备方法为：步骤一、将卵磷脂和盐霉素溶于无水乙醇；步骤二、将胆酸钠和载脂蛋白E溶于PBS；步骤三、将步骤二制得的液体进行聚合；步骤四、将步骤三中聚合后的物质透析去除胆酸钠。载脂蛋白E与盐霉素复合纳米粒在治疗癌症和在生产用于治疗癌症药物中的应用，有益效果：载脂蛋白E和盐霉素具有良好的协同作用，从而降低盐霉素使用剂量，提高其临床应用的安全性。

技术领域

本发明涉及一种复合纳米粒及制备方法和应用，特别涉及一种载脂蛋白E与盐霉素复合纳米粒及制备方法和应用。

背景技术

目前，卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一。该病起病隐匿，极易发生浸润、转移，其死亡率高居妇科恶性肿瘤之首，超过70％的病人确诊时已属晚期，患者五年生存率仅25％-30％，目前，治疗卵巢癌的方法主要为手术及铂类药物为主的基础化疗。大部分患者术后化疗早期敏感性较好，但是80％患者仍会在术后2-3年复发，并最终衍变为化疗耐药而死亡。因此，迫切需要寻找新的药物及治疗方法来提高卵巢癌患者的生存率及生活质量。

肿瘤异质性直接导致病人治疗效果及预后的差异，肿瘤组织由表型和功能不同的细胞组成，在肿瘤的生长、分化、耐药等生物特征上发挥不同的作用。肿瘤中存在极小部分细胞，极少数量即可致瘤，并且拥有类似干细胞的无限增殖能力，这类细胞被称之为肿瘤干细胞。传统肿瘤治疗主要是针对普通肿瘤细胞，结果是杀伤了普通肿瘤细胞，而肿瘤干细胞由于处于G0期，且高表达耐药蛋白，可在常规治疗中存活下来，经过一段时间的增殖、分化会再次形成新的肿瘤，导致肿瘤复发，特殊情况下，尤其当肿瘤组织内己存在的肿瘤干细胞被清除时，普通肿瘤细胞可去分化形成新的肿瘤干细胞，最终形成异质且可相互转化的肿瘤病灶。因此，采用可同时杀灭肿瘤干细胞和普通肿瘤细胞的技术，或联合应用针对肿瘤干细胞和针对普通肿瘤细胞的药物，能够在肿瘤治疗中达到预期效果。

盐霉素是一种聚醚类离子载体型抗生素，因其可特异性杀伤乳腺癌、肺癌、胰腺癌等多种肿瘤干细胞而受到广泛关注。但是其高剂量下显著的毒性以及水不溶性，一直是盐霉素难以进入临床应用的主要障碍。

纳米药物递送系统可凭借增强的通透与滞留效应，增加药物在病变部位的蓄积，即被动靶向作用，降低化疗药物的副作用，因而在肿瘤治疗领域的应用越来越广泛。但是，目前采用的大多数纳米载体均为人工合成，作为外源性物质具有免疫原性，可能引起毒、副反应。

载脂蛋白E是一个含有299个氨基酸，结合有磷脂的糖蛋白。载脂蛋白E主要在肝脏中合成，分泌入血后可结合到脂蛋白中，具有结合胆固醇的能力，并同它们一起代谢。不同类型载脂蛋白E异构体对血浆脂质水平的影响有很大差异，这主要是由于它们在介导脂蛋白通过多种途径进行代谢的能力上存在着差异。同时，载脂蛋白E还具有抑制内皮细胞迁移并抑制血管再生的功能，从而发挥抗肿瘤作用。

利用载脂蛋白E作为药物载体，合成一种包载盐霉素的靶向纳米粒——载脂蛋白E与盐霉素复合纳米粒，载脂蛋白E为人体内天然蛋白，作为仿生载体，载脂蛋白E具有良好的生物相容性。载脂蛋白E的亲脂基团结合盐霉素，亲水基因暴露在表面突入周围水相，从而使载脂蛋白E与盐霉素复合纳米粒颗粒能稳定地分散在水相中，提高盐霉素的水溶性；同时，体外实验说明载脂蛋白E与盐霉素复合纳米粒可以特异性的杀伤卵巢癌细胞，而对正常人上皮细胞(IOSE80)、人成纤维细胞(BJ)无明显毒性，说明载脂蛋白E与盐霉素复合纳米粒具有主动靶向性，可特异性的杀伤卵巢癌细胞，从而降低盐霉素对正常组织的毒性作用。