[发明专利]血浆型冻干粉儿茶酚胺类物质及代谢物的质量控制物质制备和应用

说明书

一种血浆型冻干粉儿茶酚胺类物质及代谢物的质量控制物质制备和应用，该物质由如下主要步骤制备而得：搜集临床新鲜无血浆进行传染病筛查，选择筛查结果为阴性的样本，混合在一起备用；将血浆采用活性炭吸附其中的儿茶酚胺类物质及代谢物，得空白血浆；空白血浆中添加儿茶酚胺类物质及其代谢物质的标准储备溶液，搅拌至均匀；向血浆中加入稳定剂、赋形剂、抗氧剂、防腐剂搅拌至完全溶解；获得的血浆根据规格要求用安瓿瓶进行分装、冷冻干燥制备成冻干粉。能克服新鲜血浆、冷冻血浆儿茶酚胺类物质及代谢物质量控制物质不稳定、不易长时间保存的缺点，具有均匀性、稳定性良好的优点。

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及一种血浆型冻干粉儿茶酚胺类物质及其代谢物的质量控制物质制备和应用。

背景技术

儿茶酚胺类物质(CAs)是人类中枢神经重要的信息传递物质，参与、维持和调节神经系统，是生物体内具有较强生理学活性的内源性物质，由肾上腺髓质、肾上腺神经元以及肾上腺外嗜铬体合成与分泌的单胺类神经递质，在大脑和神经信号传导中起着重要的作用。儿茶酚胺类物质主要包括去甲肾上腺素(Norepinephrine，NE)、肾上腺素(Epinephrine，E)、异丙肾上腺素和多巴胺(Dopamine，DA)。

儿茶酚胺类物质的化学结构中带有一个双羟基苯环和一个带氨基的侧链，极性较大，易溶于水，其中的邻苯二酚结构在酸性条件下比较稳定，中性或碱性条件下易被氧化成醌。生物样品中儿茶酚胺含量极微，其特殊的化学结构导致易被氧化，稳定性较差。肾上腺素(E)及去甲肾上腺素(NE)经儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)的作用下生成变肾上腺素(MN)和去甲基变肾上腺素(NMN)，肾上腺素(E)和去甲肾上腺素(NE)最终转化为3-甲氧-4-羟基苦杏仁酸(香草扁桃酸，VMA)，VMA是E和NE的主要代谢终产物，并以较高浓度出现在血浆和尿液中。

临床检测患者样本中的CAs用于嗜铬细胞瘤、副神经节瘤、神经母细胞瘤、高血压、心肌梗塞、肾上腺髓质增生等疾病的诊断和治疗，同时有助于诊断甲状腺功能异常、充血性心力衰竭、糖尿病、肾脏功能不全等疾病，具有重要的临床意义。由于MNs(MN和NMN的总称)半衰期比CAs长，受药物影响较小等特性，其诊断嗜铬细胞瘤的敏感性要高于CAs，有研究表明尿总MNs对嗜铬细胞瘤的敏感性为94.7％，高于尿CA和VMA，后两者的敏感性分别为80％和60％。由于在不同肿瘤发病阶段，CAs代谢有快有慢，进入血、尿中的浓度也会有所不同，所以临床上同时测定尿、血中的CAs及其代谢产物MNs来获得更高的诊断率。

目前用于检测CAs及MNs的方法主要有：免疫法、化学发光法、毛细管电泳法(CE)、荧光光度法(FL)、高效液相色谱电化学检测法(HPLC-ECD)、气相色谱串联质谱法(GC-MS)、液相色谱串联二级质谱法(HPLC-MS/MS)法。不同的检测方法因检测原理不同，在检测灵敏度、检测项目种类上也有很大区别，导致了其在临床上的不同应用范围。

HPLC-MS/MS法可同时测定CAs及其代谢物，重现性好，可在线分析，逐渐成为临床检测CAs及其代谢物的发展趋势。

在临床上常采用EDTA-K₂或肝素、柠檬酸抗凝血浆或尿作为临床检测CAs及其代谢物的样本。儿茶酚胺类物质及其代谢物的准确测量需要一个稳定质量控制物质来校准、监控仪器状态和试剂的好坏，目前国内尚无儿茶酚胺类物质及其代谢物的质量控制物质制备方法的专利相关报道信息。国内美康生物发明的“用于准确测定体液样本中儿茶酚胺和变肾上腺素的质谱试剂盒”专利中有包含质控品1、2，但该专利未涉及到质控品的相关制备方法信息。

在临床检测CAs及其代谢物时由于检测样本为血浆，如果质量控制物质的基质与待测样本相同或相似，就可以更好的监测实验方法的准确性和稳定性。虽然可以直接使用血浆作为质量控制物质用于临床监测，但由于血浆为液体，临床实验室缺少超低温保存装置，导致其不宜长久保存。

发明内容