[发明专利]一种用于检测山羊鼻内肿瘤病毒的荧光PCR引物、探针及试剂盒

权利要求书

1.一种用于检测山羊鼻内肿瘤病毒的荧光PCR引物组，其特征在于，所述引物组的核苷酸序列为：

ENTV2-F：5’-ATGGCAATAGTTTATATCTGCAAT-3’；

ENTV2-R：5’-GATGGCCTTGTATCAACATAAATGG-3’。

2.一种用于检测山羊鼻内肿瘤病毒的荧光PCR探针，其特征在于，所述探针的核苷酸序列为：

5’-ATATAAGAATCCCGTAACACCTACATCTC-3’。

3.根据权利要求2所述的荧光PCR探针，其特征在于，所述探针序列5’端标记的荧光基团为FAM，探针序列3’端标记的淬灭基团为BHQ。

4.一种用于检测山羊鼻内肿瘤病毒的荧光PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含权利要求1的PCR引物组、权利要求2或3所述的探针。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包括反转录混合酶、缓冲液。

6.如权利要求1所述引物组在检测山羊鼻内肿瘤病毒的荧光PCR试剂盒中的应用，其特征在于，包含以下步骤：

(1)核酸提取：提取待检样品中的RNA；

(2)荧光定量PCR：以提取的核酸为模板，用权利要求1所述引物组ENTV2-F、ENTV2-R、权利要求2或3所述探针进行荧光定量PCR，获得扩增曲线；

(3)结果判断：对扩增曲线进行分析，以确定样本是否含有山羊鼻内肿瘤病毒。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤(2)荧光PCR反应程序为：50℃反转录30min；94℃预变性2min；98℃变性10s，53℃退火延伸30s，共计45个循环。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤(2)荧光PCR反应体系：

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤(3)结果判断：阳性对照有标准S曲线产生，阴性对照无曲线产生的情况下，待检样品出现典型的S曲线且Ct值≦40，判定为山羊鼻内肿瘤病毒核酸阳性；Ct值>40或是无Ct值，则判定为山羊鼻内肿瘤病毒核酸阴性。