[发明专利]一种增强胶质瘤替莫唑胺敏感性的纳米抑制剂及制备方法

说明书

本发明公开了一种增强胶质瘤替莫唑胺敏感性的纳米抑制剂及制备方法。所述的纳米抑制剂中含有能够增强胶质瘤替莫唑胺敏感性的纳米颗粒，所述的纳米颗粒是由血清蛋白质底座和双靶向的功能化聚合物凝胶外壳组成，其功能化聚合物凝胶外壳表面偶联有靶向EGFR和MET的功能性多肽。本发明的纳米抑制剂能够在生理环境下稳定存在，具备高效跨血脑屏障(blood brain barrier，BBB)入脑的能力，且能够有效抑制EGFR和MET两类通路的异常磷酸化程度，进而达到多靶点协同干扰DNA损伤修复的目的，最终结合传统化疗药物替莫唑胺实现对胶质瘤细胞的高效杀伤。此外，该纳米抑制剂制备方法简单，易于操作，成本较低，易于推广应用。

技术领域

本发明涉及一种可增强胶质瘤替莫唑胺敏感性的纳米抑制剂及其制备和应用。本发明属于医药技术领域。

背景技术

胶质瘤(glioma)是最常见的原发性中枢神经系统恶性肿瘤，肿瘤异质性极强，预后差，复发率高，中位生存时间低。有详细文献报道，胶质瘤患者的中位生存时间约为15个月，只有3～5％患者存活超过36个月。胶质瘤的标准化治疗包括放疗以及使用DNA烷基化试剂替莫唑胺(temozolomide，TMZ)进行化疗。不幸地是，由于DNA损伤修复蛋白的表达水平的提升，使得很大程度上胶质瘤对替莫唑胺诱导的DNA损伤具有显著抗性。尽管临床试验和实验证据明显显示，生物靶向治疗可以作为替莫唑胺耐药胶质瘤患者的替代或辅助治疗的选择，但由于多种信号通路之间存在复杂的关联性，这使得单一的生物靶向治疗不能充分发挥其治疗潜力。

受体酪氨酸激酶(RTK)蛋白的共激活，包括胰岛素样生长因子受体(IGFR)、肝生长因子受体(MET)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR)、血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)和表皮生长因子受体(EGFR)家族，是肿瘤细胞形成获得性化疗抗性的重要机制及通路。研究表明，作为RTK家族成员，表皮生长因子受体(EGFR)、间充质-上皮转化因子(MET)和两种主要的下游通路(Ras/MAPK/ERK和Ras/PI3K/AKT)可触发不受控制的细胞生长、血管生成、转移侵袭和化疗耐性。EGFR与MET之间的复杂的信号交流导致胶质瘤细胞的恶性发展，如DNA损伤修复等，进而使得化疗临床治疗效果极差。为此，可能需要对EGFR和MET进行双重抑制，以减弱通过RTK途径的补偿信号引起的胶质瘤细胞的化疗抗性。转录因子E2F1的表达直接导致化疗的耐药性和较差的预后。因此，探索一种同时靶向EGFR和MET的潜在有效双靶向治疗策略，对于在胶质瘤中克服经E2F1通路导致的替莫唑胺耐药性至关重要。

发明内容

本发明目的是针对现有生物靶向治疗技术中存在的上述不足，提供一种可增强胶质瘤替莫唑胺敏感性的纳米抑制剂及其制备方法和应用。此纳米抑制剂能够在生理环境下稳定存在，同时具备高效跨血脑屏障(blood brain barrier，BBB)入脑的能力(因纳米抑制剂表面含有大量磷酰胆碱类聚合物)。

为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

本发明发明人在近期工作中通过蛋白组学等方法筛选并发现了脑上皮细胞表面高结合力胆碱转运体1(CHT1)是一种潜在的跨血脑屏障转运结构，而聚2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱(PMPC)包裹的纳米颗粒可被CHT1介导增强其跨越血脑屏障的效果。靶向EGFR和MET的功能性多肽，分别记为EGFR结合肽(EGFR binding peptide，EBP)和MET结合肽(METbinding peptide，MBP)，这两类多肽与胶质瘤表面过表达的相关受体有极强的亲和力，可实现高效靶向胶质瘤细胞。纳米体系具有独特的结构效应(如尺寸效应等)和多价界面效应，因此建立一种表面偶联有靶向EGFR和MET的功能性多肽的聚2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰胆碱(PMPC)包裹的纳米颗粒，能够有效抑制上述两类通路的异常磷酸化程度，进而达到多靶点协同干扰DNA损伤修复的目的，最终结合传统化疗药物替莫唑胺实现对胶质瘤细胞的高效杀伤。