[发明专利]一种对硫磷半抗原、完全抗原的制备方法与应用有效
申请号: | 202010014296.8 | 申请日: | 2020-01-07 |
公开(公告)号: | CN111171073B | 公开(公告)日: | 2022-11-01 |
发明(设计)人: | 吕丽兰;何丽珊;张娅;邹承武;甘志勇;彭靖茹;吴静娜;吕玉莲;吴凤;李鸿;李乾坤;杜国冬;何惠欢;易国强;温绍聪;陈能;刘唯 | 申请(专利权)人: | 广西壮族自治区亚热带作物研究所(广西亚热带农产品加工研究所) |
主分类号: | C07F9/18 | 分类号: | C07F9/18;C07K14/765;C07K1/107;C07K16/44;G01N33/53 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 吴爱琴 |
地址: | 530002 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 对硫磷 半抗原 完全 抗原 制备 方法 应用 | ||
1.对硫磷半抗原或对硫磷完全抗原在制备抗对硫磷的特异性抗体中的应用;
所述对硫磷半抗原其化学名为:3-氯-4 -((二乙氧基硫代磷酰基)氧基)苯甲酸,结构式如下:
所述对硫磷完全抗原由所述对硫磷半抗原与载体蛋白偶联后得到。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述对硫磷完全抗原通过如下方法制备得到:1)将对硫磷半抗原溶于二甲基甲酰胺中,加入二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺,室温搅拌得到A液;
2)将载体蛋白溶于碳酸盐缓冲液中,得到B液;
3)将上述A液滴加到B液中,搅拌,得到C液;
4)将C液置于透析袋并于磷酸缓冲液中透析,收集透析袋中的溶液,即为有机磷农药对硫磷完全抗原。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:步骤1)中,对硫磷半抗原、二甲基甲酰胺、二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的用量比依次为:20μmol ∶1-2mL∶60-120 μmol∶60-120μmol;
所述室温搅拌的时间为:18-24小时;
步骤2)中,所述载体蛋白为牛血清蛋白;
载体蛋白和碳酸盐缓冲液的用量比为:0.4μmol∶3-6mL;
对硫磷半抗原与载体蛋白的摩尔比为:20:1-40:1;
步骤3)中,所述搅拌在4-25℃温度下搅拌10-12小时;
步骤4)中,所述透析过程中,每3小时换液一次,进行6次透析。
4.由权利要求1中所述的对硫磷完全抗原制备得到的抗对硫磷的特异性抗体。
5.权利要求4所述的抗对硫磷的特异性抗体以下任一应用:
1)在检测对硫磷中的应用
2)在制备对硫磷的ELISA检测用试纸盒中的应用;
3)在制备对硫磷的胶体金检测试纸条中的应用。
6.由权利要求4所述的抗对硫磷的特异性抗体制备的对硫磷检测试剂或试剂盒。
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