[发明专利]脐带间充质干细胞的三维培养方法有效
| 申请号： | 202010018006.7 | 申请日： | 2020-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN111139220B | 公开（公告）日： | 2022-04-12 |
| 发明（设计）人： | 胡士庶;宋芸娟;刘露林;沈洁;沈艳 | 申请（专利权）人： | 深圳市旷逸生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 单骁越 |
| 地址： | 518051 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 脐带 间充质 干细胞 三维 培养 方法 | ||
1.一种脐带间充质干细胞的三维培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
将脐带间充质干细胞接种于细胞培养器中后，将接种在所述细胞培养器中的脐带间充质干细胞在37℃、20rpm～40rpm条件下水平旋转孵育；及
将孵育后的脐带间充质干细胞在450rmp～550rmp的转速下离心2.5min～3.5min，然后在水平转速为20rpm～40rpm条件下旋转培养所述脐带间充质干细胞，其中，所述细胞培养器为U型细胞板，所述细胞培养器的底部的内表面经抗细胞贴附处理。
2.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞的三维培养方法，其特征在于，所述旋转培养的水平转速为30rpm。
3.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞的三维培养方法，其特征在于，培养所述脐带间充质干细胞的培养基为以Ultroser G替代血清的干细胞培养基。
4.根据权利要求3所述的脐带间充质干细胞的三维培养方法，其特征在于，所述干细胞培养基中Ultroser G的质量百分含量为1.5％～2.5％。
5.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞的三维培养方法，其特征在于，所述将脐带间充质干细胞接种于细胞培养器中的步骤中，接种密度为50个/μL～80个/μL。
6.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞的三维培养方法，其特征在于，所述孵育的时间为1h。
7.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞的三维培养方法，其特征在于，还包括以脐带为原料制备脐带间充质干细胞的步骤。
8.根据权利要求7所述的脐带间充质干细胞的三维培养方法，其特征在于，所述以脐带为原料制备脐带间充质干细胞的步骤包括：
将脐带剪切为2cm～3cm组织块，去除脐动脉和脐静脉，剥离脐带胶质，接着将剥离脐带胶质的组织块剪碎成1mm3～3mm3的组织块后，加入无血清间充质干细胞完全培养基培养，得到脐带间充质干细胞。
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