[发明专利]一种电化学法检测肌酐的试纸条及其制备方法在审
| 申请号： | 202010026068.2 | 申请日： | 2020-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN111189899A | 公开（公告）日： | 2020-05-22 |
| 发明（设计）人： | 陈军刚 | 申请（专利权）人： | 杭州联晟生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N27/327 | 分类号： | G01N27/327;G01N33/543 |
| 代理公司： | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人： | 金方玮 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 电化学 检测 试纸 及其 制备 方法 | ||
1.一种电化学法检测肌酐的试纸条，其特征在于，包括：基板，设置于所述基板上的工作电极、对照电极、对电极、开机电极，设置于所述电极层上的绝缘层，设置于绝缘层上并对应于工作电极位置的第一酶载体层，设置于绝缘层上并对应于对照电极位置的第二酶载体层，设置于所述酶载体层上的滤血膜，设置于滤血膜上的扩散层，覆盖所述酶载体层、滤血膜、扩散层两侧的双面胶层，形成于双面胶层上并连通扩散层的虹吸孔，设置于双面胶层上并与双面胶层形成虹吸结构的亲水层；
所述第一酶载体层上第一反应液的配方包括：5-100KU/L肌酐酶，5-200KU/L肌氨酸氧化酶，5-200KU/L肌酸水解酶,1-100KU/L抗坏血酸氧化酶，1-100KU/L过氧化物酶，10-200g/L分散剂，0.1-10g/L表面活性剂，0.05-1M缓冲液；
所述第二酶载体层上第二反应液的配方包括：5-200KU/L肌氨酸氧化酶，5-200KU/L肌酸水解酶,1-100KU/L抗坏血酸氧化酶，1-100KU/L过氧化物酶，10-200g/L稳定剂，0.1-10g/L表面活性剂，0.05-1M缓冲液。
2.根据权利要求1所述的一种电化学法检测肌酐的试纸条，其特征在于，所述双面胶层包括：放置酶载体层并设置于绝缘层上的第一双面胶层，设置于扩散层上端和两侧的第二双面胶层、第三双面胶层、第四双面胶层；所述第一双面胶层设置有用于放置第一酶载体层、第二酶载体层的安装孔。
3.根据权利要求1所述的一种电化学法检测肌酐的试纸条，其特征在于，所述工作电极和对照电极上有电子介体；所述电子介体包括：铁氰化钾，二茂铁及其衍生物，苯醌及其衍生物，普鲁士蓝。
4.根据权利要求1所述的一种电化学法检测肌酐的试纸条，其特征在于，对电极包括：对应于工作电极位置的第一对电极，对应于对照电极位置的第二对电极，所述第一对电极、第二电极为银+氯化银的电极。
5.根据权利要求1所述的一种电化学法检测肌酐的试纸条，其特征在于，所述稳定剂包括：蛋白类稳定剂，多糖类稳定剂，聚乙二醇稳定剂。
6.根据权利要求1所述的一种电化学法检测肌酐的试纸条，其特征在于，所述表面活性剂包括：tween-20,tween-80,tritonX-100,triton X-405,Emulgen B66,OP-10。
7.根据权利要求1所述的一种电化学法检测肌酐的试纸条，其特征在于，所述缓冲液包括：磷酸缓冲液，TRIS缓冲液，MES缓冲液。
8.根据权利要求1所述的一种电化学法检测肌酐的试纸条，其特征在于，第一反应液的配方包括：50KU/L肌酐酶，100KU/L肌氨酸氧化酶，100KU/L肌酸水解酶,20KU/L抗坏血酸氧化酶，50KU/L过氧化物酶，20g/L聚乙烯吡咯烷酮，0.1g/L Emulgen B66，0.05MPH＝6的磷酸缓冲液。
9.根据权利要求1所述的一种电化学法检测肌酐的试纸条，其特征在于，第二反应液的配方包括：100KU/L肌氨酸氧化酶，100KU/L肌酸水解酶,20KU/L抗坏血酸氧化酶，50KU/L过氧化物酶，20g/L聚乙烯吡咯烷酮，0.1g/L Emulgen B66，0.05MPH＝6的磷酸缓冲液。
10.一种电化学法检测肌酐的试纸条的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一：按照如下配方配制第一反应液，配方包括：5-100KU/L肌酐酶，5-200KU/L肌氨酸氧化酶，5-200KU/L肌酸水解酶，1-100KU/L抗坏血酸氧化酶，1-100KU/L过氧化物酶，10-200g/L分散剂，0.1-10g/L表面活性剂，0.05-1M缓冲液；搅拌一小时后待用；
步骤二：按照如下配方配制第二反应液，配方包括：5-200KU/L肌氨酸氧化酶，5-200KU/L肌酸水解酶，1-100KU/L抗坏血酸氧化酶，1-100KU/L过氧化物酶，10-200g/L稳定剂，0.1-10g/L表面活性剂，0.05-1M缓冲液；搅拌一小时后待用；
步骤三：制备第一酶载体层，
将酶载体层浸泡在第一反应液中1-10min后取中，25-50度环境下干燥10-60min后得到第一酶载体层，待用；
步骤四：制备第二酶载体层，
将酶载体层浸泡在第二反应液中1-10min后取中，25-50度环境下干燥10-60min后得到第二酶载体层，待用；
步骤五：将电子介体加入碳浆中，搅拌均一，得到混合碳浆，待用；
步骤六：取基板，先印刷对电极，然后再取混合碳浆印制工作电极和对照电极，再印刷绝缘层，得到电极板，烘干待用；
步骤七：取电极板，贴双面胶，再将第一酶载体层和第二酶载体层放在第一双面胶层上，再将滤血膜贴在第一酶载体层和第二酶载体层的上面，再在滤血膜上贴扩散膜，最后贴装第二双面胶层、第三双面胶层、第四双面胶层，再在第二双面胶层、第三双面胶层、第四双面胶层上贴亲水膜构建形成虹吸通道，经过裁切后得到试纸条成品。
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