[发明专利]G蛋白偶联受体的抗体及其制备方法和G蛋白偶联受体试剂盒

权利要求书

1.一种G蛋白偶联受体的抗体制备方法，其特征在于包括以下步骤：

步骤一、选择多个多肽免疫原作为同源性相近的两个或以上G蛋白偶联受体的抗原多肽组，修饰各多肽免疫原，纯化，得到抗原决定簇多肽；

所述抗原决定簇多肽的氨基酸序列为：

FZD8/FZD5 CNHDTQDEAGLEVHQFWR；

GPR109/HCAR2 CLQRKMTGEPDNNRSTR；

OR10C1/OR10C1 CHLLTGRRHISRSR；

OR2A5/2A14 CKSRHPEEQQKVLR；

OR2AG1/2 CADFLRRENTISFR；

OR2T2/2T35 CHRMNSAEGRRKAFR；

OR2T2/2T35 CLQDLLSKDKTISFR；

OR4F4/4F5/4F17 CDFFSQRKVISFKR；

OR5AU1/OR5AU1 CLKMSSAQGRFKAFR；

OR1S1/1S2 CPSSTHPEDTDKIGR；

OR2A4/7 CVGPRYGNPKEQKR；

OR2AG1/2 CLADFLRRENTISFR；

OR2T2/35 CQDLLSKDKTISFR；

OR2T3/34 CLRSMMQSRMNQEKR；

OR4A4/47 CYTLRNSEMTSAMKKLR；

OR8B2/B3 CHIKSTQGRSKAFR；

OR11H1/11H2/11H12 CSLQNKEIKAALRKR；

OR13C2/13C9 CMKPKSKETLNSDR；

OR2T5/2T29 VNKVSAPECGMQMR；

OR10H3/10H4 CYLKPKGLHSMYSDR；

OR10K1/10K2 CDLLSQKKTISFLR；

OR1D4/5 CQMPSASKKYKTFR；

OR1D4/5 CLQMPSASKKYKTFSR；

OR3A2/3 CRLLSHKSTISYDR；

OR5M1/5M10 CMYVRPPSEKSVER；

OR10X1/OR10R3P CSAEGKQKAFR；

步骤二、将质量比为（3-8）：（3-8）：1的抗原决定簇多肽、血蓝蛋白和Sulfo-SMCC偶联，纯化，加入弗氏佐剂进行乳化，形成全抗原；抗原决定簇多肽和血蓝蛋白的质量比为1:1；

步骤三、将所述全抗原采用多克隆抗体技术制备抗血清；

步骤四、将抗血清进行预处理后，与抗原决定簇多肽、偶联树脂进行拌样混合后装入层析柱，采用pH3.0的甘氨酸缓冲液作为洗脱液，收集洗脱液，得到抗体。

2. 根据权利要求1所述G蛋白偶联受体的抗体制备方法，其特征在于所述步骤四中抗血清预处理具体为：将待处理的各批次血清混合后，依次加入1mol/L pH7.5的Tris•HCl缓冲液，0.2 mol/L正钒酸钠溶液、0.1 mol/L氟化钠溶液，在室温下混匀静置，过滤待用。

3.根据权利要求2所述G蛋白偶联受体的抗体制备方法，其特征在于所述步骤四中偶联树脂为Sulfolink Gel，所述抗原决定簇多肽和偶联树脂的质量比为0.5:1。

4.一种G蛋白偶联受体试剂盒，其特征在于：包括权利要求1-3任一项制备的G蛋白偶联受体的抗体和抗体稀释液。

5.根据权利要求4所述的G蛋白偶联受体试剂盒，其特征在于：所述抗体稀释液以质量分数计的以下组分： 0.5-2% BSA，0.1-1% Triton X-100， 0.05-0.2% 叠氮钠溶液和96.8-99.35%PBS。