[发明专利]G蛋白偶联受体的抗体及其制备方法和G蛋白偶联受体试剂盒

说明书

本发明涉及生物检测试剂技术领域，具体涉及G蛋白偶联受体的抗体及其制备方法和G蛋白偶联受体试剂盒。一种G蛋白偶联受体的抗体由抗原决定簇多肽与血蓝蛋白偶联形成全抗原，再经多克隆抗体技术制备而成；所述抗原决定簇多肽包括多个多肽免疫原，所述多肽免疫原分别经半胱氨酸和精氨酸修饰。本发明所提供的G蛋白偶联受体的抗体可同时识别同源性相近的G蛋白偶联受体，使用该抗体生产的G蛋白偶联受体试剂盒针对细胞水平G蛋白偶联受体信号快速检测。

技术领域

本发明涉及生物检测试剂技术领域，具体涉及G蛋白偶联受体的抗体及其制备方法和G蛋白偶联受体试剂盒。

背景技术

G蛋白偶联受体（GPCRs）是已知的数量最多的膜受体家族，在生理病理过程中起重要生物作用，是主要的药物靶点超级家族。主要功能是介导胞外信号进入细胞内部，参与自分泌，旁分泌，内分泌系统信号一系列细胞内部重要的反应。大约50%的小分子治疗的靶位是GPCRs，GPCRs的配体包含很广，包括蛋白质，多肽，糖类，脂类等等。对于大多数GPCRs，外部的配体结合与膜内受体上，引起结构改变，使得膜内几个或上百个鸟苷酸三聚体活化而去结合G蛋白，实现分子构象意义上的信号传导。目前，人们对GPCR的结构与功能、信号通路及其调控机制等的了解还十分有限，仍有一半以上的GPCRs为配体未知的孤儿受体，其生物学功能仍不明确，因此，生产能够在分子水平上检测GPCRs的抗体有十分广阔的科研价值和经济前景。现有检测GPCRs的方法一般是使用多肽作为免疫原的抗体生产工艺，针对某个具体一个GPCR的含量变化检测，检测结果具有局限性，往往需要购买大量抗体或试剂盒检测GPCR的变化，才能开展下游实验。本试剂盒采用GPCR蛋白中高度同源序列，为了保证特定应用均采取预测多个抗原决定簇，合成多个多肽序列做试验，最终采用混合免疫原的多克隆抗体制备试剂盒，可快速鉴定对应信号通路的变化，为药物筛选，靶点研究提供方便快捷的工具。

发明内容

为了克服上述技术缺陷的不足，本发明设计了G蛋白偶联受体的抗体及其制备方法和G蛋白偶联受体试剂盒。

为了达到上述目的，本发明提供一种G蛋白偶联受体的抗体，关键在于：抗原决定簇多肽与血蓝蛋白偶联形成全抗原，再经多克隆抗体技术制备而成；

所述抗原决定簇多肽包括多个多肽免疫原，所述多肽免疫原分别采用半胱氨酸和精氨酸修饰。

优选的，所述抗原决定簇多肽的氨基酸序列为：

FZD8/FZD5 CNHDTQDEAGLEVHQFWR；

GPR109/HCAR2 CLQRKMTGEPDNNRSTR；

OR10C1/OR10C1 CHLLTGRRHISRSR；

OR2A5/2A14 CKSRHPEEQQKVLR；

OR2AG1/2 CADFLRRENTISFR；

OR2T2/2T35 CHRMNSAEGRRKAFR；

OR2T2/2T35 CLQDLLSKDKTISFR；

OR4F4/4F5/4F17 CDFFSQRKVISFKR；

OR5AU1/OR5AU1 CLKMSSAQGRFKAFR；

OR1S1/1S2 CPSSTHPEDTDKIGR；

OR2A4/7 CVGPRYGNPKEQKR；

OR2AG1/2 CLADFLRRENTISFR；

OR2T2/35 CQDLLSKDKTISFR；

OR2T3/34 CLRSMMQSRMNQEKR；