[发明专利]一种脂肪酶突变体及其在制备(S)-2-氯苯甘氨酸甲酯中的应用有效
| 申请号： | 202010036222.4 | 申请日： | 2020-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN111117983B | 公开（公告）日： | 2021-10-01 |
| 发明（设计）人： | 王亚军;班善赟;程峰;翁春跃;郑裕国 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/20 | 分类号： | C12N9/20;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P41/00;C12P13/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 杭州之江专利事务所(普通合伙) 33216 | 代理人： | 牛世静 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 脂肪酶 突变体 及其 制备 氯苯 甘氨酸 中的 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种脂肪酶突变体，其特征在于，所述脂肪酶突变体由SEQ ID No.2所示氨基酸序列第157位的谷氨酰胺突变为苯丙氨酸，第189位的异亮氨酸突变为赖氨酸，且第154位的缬氨酸突变为天冬氨酸而获得。
2.一种如权利要求1所述的脂肪酶突变体的编码基因。
3.一种包含权利要求2所述编码基因的重组载体。
4.一种包含权利要求2所述编码基因的基因工程菌。
5.如权利要求1所述的脂肪酶突变体在拆分(R,S)-2-氯苯甘氨酸甲酯制备单一对映体(S)-2-氯苯甘氨酸甲酯中的应用。
6.如权利要求4所述的基因工程菌在拆分(R,S)-2-氯苯甘氨酸甲酯制备单一对映体(S)-2-氯苯甘氨酸甲酯中的应用。
7.一种拆分(R,S)-2-氯苯甘氨酸甲酯制备单一对映体(S)-2-氯苯甘氨酸甲酯的方法，其特征在于，包括：在缓冲溶液中，以(R,S)-2-氯苯甘氨酸甲酯为底物，权利要求1所述脂肪酶突变体或权利要求4所述基因工程菌为生物催化剂，进行不对称水解反应，得到单一对映体(S)-2-氯苯甘氨酸甲酯。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述缓冲溶液为磷酸盐缓冲液；磷酸盐缓冲液的pH值为6～9，浓度为0.05～0.2M。
9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，反应体系中，反应温度为25～35℃，反应时间为10～16h。
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