[发明专利]一种从哺乳动物粪便中高效富集宿主DNA的方法有效
| 申请号： | 202010037073.3 | 申请日： | 2020-01-14 |
| 公开（公告）号： | CN113186185B | 公开（公告）日： | 2023-05-26 |
| 发明（设计）人： | 徐艳春;崔靓玉;杨淑慧;马跃 | 申请（专利权）人： | 东北林业大学;深圳华大生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 邓宇 |
| 地址： | 150036 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 哺乳动物 粪便 高效 富集 宿主 dna 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种从哺乳动物粪便中富集宿主DNA的方法，其特征在于，在提取粪便DNA前，先将粪便样本经PBS缓冲液和SDS预处理，所述预处理方法如下：
1)将粪便样本与10mmol/L磷酸缓冲液PBS溶液混合后，加入SDS溶液至终浓度为质量分数0.01％～5％混匀，在室温下静置1～30min；所述粪便样本与磷酸缓冲液PBS溶液的比例为180～220mg:300μL；
2)然后离心取上清；所述离心条件为12000×g离心10min；
上清液用于DNA的提取。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中针对草食兽粪便样本时，室温下静置时间为1～15min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中针对肉食兽粪便样本时，室温下静置时间为1～10min。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述加入SDS溶液终浓度为质量分数1％。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述提取DNA的方法包括基因组DNA试剂盒提取法和有机溶剂抽提法。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述草食兽粪便样本室温下静置时间为5min。
7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述肉食兽粪便样本室温下静置时间为3min。
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