[发明专利]一种用于葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）基因突变检测的引物序列及试剂盒

权利要求书

1.一组用于G6PD基因致病性突变区域扩增的引物组合序列，其特征在于，包括如下所示引物：

扩增位点为rs137852340的扩增引物序列如SEQ ID NO：1～2所示；

扩增位点为rs78365220和rs137852341的扩增引物序列如SEQ ID NO：3～4所示；

扩增位点为rs137852314、rs137852331、rs137852343和rs137852330的扩增引物序列如SEQ ID NO：5～6所示；

扩增位点为rs137852327、rs1557229854和rs137852342的扩增引物序列如SEQ ID NO：7～8所示；

扩增位点为rs2230037、rs398123546、rs72554665、rs782608284、rs1557229502和rs72554664的扩增引物如SEQ ID NO：9～10所示；

检测位点为rs137852314的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：11；

检测位点为rs137852343的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：12；

检测位点为rs137852330的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：13；

检测位点为rs1557229854的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：14；

检测位点为rs137852327的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：15；

检测位点为rs137852342的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：16；

检测位点为rs72554664的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：17；

检测位点为rs72554665的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：18；

检测位点为rs137852341的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：19；

检测位点为rs137852340的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：20；

检测位点为rs78365220的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：21；

检测位点为rs398123546的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：22；

检测位点为rs2230037的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：23；

检测位点为rs782608284的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO24；

检测位点为rs137852331的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：25；

和检测位点为rs1557229502的单碱基延伸反应引物为SEQ ID NO：26。

2.一种用于检测G6PD基因常见致病性突变的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括如下试剂：

(1)飞行时间质谱检测系统核酸样本预处理试剂：包括如下主要组分

(2)扩增反应引物预混合液：SEQ ID NO：1～10所示的核苷酸序列的混合液，各引物浓度为0.3～3μM；

(3)单碱基延伸反应引物预混合液：SEQ ID NO：11～26所示的核苷酸序列的混合液，各引物浓度介于5～30μM；

(4)除盐树脂：包括去除延伸反应液盐离子的阳离子交换树脂粉末；

(5)检测芯片：包括含384个已预点基质的检测点的硅基芯片；

(6)纯突变对照：包含如权利要求1所述的16个位点突变阳性的人G6PD基因对应片段质粒水溶液，浓度大于500拷贝/μL；

(7)杂合对照：包含如权利要求1所述的16个位点突变阳性的人G6PD基因对应片段质粒、野生型人基因组DNA(gDNA)的混合水溶液，突变型质粒和野生型人gDNA拷贝浓度相等，浓度大于500拷贝/μL；以及

(8)纯野生对照：包含野生型人gDNA的水溶液，G6PD基因浓度大于500拷贝/μL。

3.根据权利要求2所述的用于G6PD基因常见致病性突变检测的试剂盒，其特征在于，所述扩增反应引物预混合液具体为：如权利要求1所述的SEQ ID NO：1～10所示的引物的混合液，各引物等比例混合，最终摩尔浓度浓度均为0.5μM。

4.根据权利要求2所述的用于G6PD基因常见致病性突变检测的试剂盒，其特征在于，所述扩增反应引物预混合液具体为：如权利要求1所述的SEQ ID NO：1～6所示引物浓度0.5μM；SEQ ID NO：7～8所示引物浓度1μM；SEQ ID NO：9～10所示引物浓度2μM。