[发明专利]一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的一步法试剂盒有效
申请号: | 202010041731.6 | 申请日: | 2020-01-15 |
公开(公告)号: | CN111876523B | 公开(公告)日: | 2021-07-13 |
发明(设计)人: | 林峻 | 申请(专利权)人: | 福州大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 福州君诚知识产权代理有限公司 35211 | 代理人: | 戴雨君 |
地址: | 350000 福建省福州市*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 分子 检测 sars cov 冠状病毒 一步法 试剂盒 | ||
1.一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的引物和探针组,其特征在于:其由下列引物和探针组成:
上游引物detF:
5‘TCCTGGTGATTCTTCTTCAGGT 3’;
下游引物detR:
5‘TCCTAGGTTGAAGATAACCCACA 3’;
探针probe:
5‘AGCTGCAGCACCAGCTGTCCA 3’;
所述探针的5’端进行荧光基团修饰,所述探针的3’端进行猝灭基团修饰。
2.根据权利要求1所述的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的引物和探针组,其特征在于:所述探针的5’端结合有FAM荧光基团修饰,所述探针的3’端结合有BHQ1猝灭基团修饰。
3.基于权利要求1所述的引物和探针组的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的试剂盒,其特征在于:其包括
1)2X RT-qPCR mix;
2)上游引物detF;
3)下游引物detR;
4)探针probe;
5)阳性质控品;
6)阴性质控品。
4.根据权利要求3所述的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的试剂盒,其特征在于:所述上游引物的母液浓度为10μM,工作浓度为0.2μM,所述下游引物的母液浓度为10μM,工作浓度为0.2μM;所述探针的母液浓度为10μM,工作浓度为0.2μM。
5.根据权利要求3所述的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的试剂盒,其特征在于:所述阳性质控品为人工合成的含有SARS-CoV-2病毒的RNA,并由来自于人类293T细胞的totalRNA稀释;所述阴性质控品为来自于人类293T细胞的total RNA。
6.根据权利要求5所述的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的试剂盒,其特征在于:人工合成含有SARS-CoV-2病毒的RNA过程,设计并合成2条oligo,用于体外转录,制备SARS-CoV-2病毒的RNA,2条oligo的序列如下:
Oligo A:
5’AATTAACCCTCACTAAAGTCCTGGTGATTCTTCTTCAGGTTGGACAGCTGGTGCTGCAGCTTATTATGTGGGTTATCTTCAACCTAGGAC 3’;
Oligo B:
5’GTCCTAGGTTGAAGATAACCCACATAATAAGCTGCAGCACCAGCTGTCCAACCTGAAGAAGAATCACCAGGACTTTAGTGAGGGTTAATT 3’。
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