[发明专利]一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的一步法试剂盒有效

专利信息
申请号: 202010041731.6 申请日: 2020-01-15
公开(公告)号: CN111876523B 公开(公告)日: 2021-07-13
发明(设计)人: 林峻 申请(专利权)人: 福州大学
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
代理公司: 福州君诚知识产权代理有限公司 35211 代理人: 戴雨君
地址: 350000 福建省福州市*** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 分子 检测 sars cov 冠状病毒 一步法 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的引物和探针组,其特征在于:其由下列引物和探针组成:

上游引物detF:

5‘TCCTGGTGATTCTTCTTCAGGT 3’;

下游引物detR:

5‘TCCTAGGTTGAAGATAACCCACA 3’;

探针probe:

5‘AGCTGCAGCACCAGCTGTCCA 3’;

所述探针的5’端进行荧光基团修饰,所述探针的3’端进行猝灭基团修饰。

2.根据权利要求1所述的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的引物和探针组,其特征在于:所述探针的5’端结合有FAM荧光基团修饰,所述探针的3’端结合有BHQ1猝灭基团修饰。

3.基于权利要求1所述的引物和探针组的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的试剂盒,其特征在于:其包括

1)2X RT-qPCR mix;

2)上游引物detF;

3)下游引物detR;

4)探针probe;

5)阳性质控品;

6)阴性质控品。

4.根据权利要求3所述的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的试剂盒,其特征在于:所述上游引物的母液浓度为10μM,工作浓度为0.2μM,所述下游引物的母液浓度为10μM,工作浓度为0.2μM;所述探针的母液浓度为10μM,工作浓度为0.2μM。

5.根据权利要求3所述的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的试剂盒,其特征在于:所述阳性质控品为人工合成的含有SARS-CoV-2病毒的RNA,并由来自于人类293T细胞的totalRNA稀释;所述阴性质控品为来自于人类293T细胞的total RNA。

6.根据权利要求5所述的一种分子检测SARS-CoV-2冠状病毒的试剂盒,其特征在于:人工合成含有SARS-CoV-2病毒的RNA过程,设计并合成2条oligo,用于体外转录,制备SARS-CoV-2病毒的RNA,2条oligo的序列如下:

Oligo A:

5’AATTAACCCTCACTAAAGTCCTGGTGATTCTTCTTCAGGTTGGACAGCTGGTGCTGCAGCTTATTATGTGGGTTATCTTCAACCTAGGAC 3’;

Oligo B:

5’GTCCTAGGTTGAAGATAACCCACATAATAAGCTGCAGCACCAGCTGTCCAACCTGAAGAAGAATCACCAGGACTTTAGTGAGGGTTAATT 3’。

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