[发明专利]一种丹参P450突变体及其应用

权利要求书

1.蛋白质，所述蛋白质为如下（a1）-（a9）中的任一种：

（a1）将序列表中序列2所示的蛋白质进行如下点突变得到的蛋白质：第301位氨基酸残基由D突变为E，第479位氨基酸残基由V突变为F；

（a2）将序列表中序列2所示的蛋白质进行如下点突变得到的蛋白质：第301位氨基酸残基由D突变为E，第395位氨基酸残基由I突变为M；

（a3）将序列表中序列2所示的蛋白质进行如下点突变得到的蛋白质：第306位氨基酸残基由S突变为E；

（a4）将序列表中序列2所示的蛋白质进行如下点突变得到的蛋白质：第301位氨基酸残基由D突变为E，第395位氨基酸残基由I突变为M，第479位氨基酸残基由V突变为F；

（a5）将序列表中序列2所示的蛋白质进行如下点突变得到的蛋白质：第479位氨基酸残基由V突变为F；

（a6）将序列表中序列2所示的蛋白质进行如下点突变得到的蛋白质：第301位氨基酸残基由D突变为E；

（a7）将序列表中序列2所示的蛋白质进行如下点突变得到的蛋白质：第306位氨基酸残基由S突变为E，第479位氨基酸残基由V突变为F；

（a8）将序列表中序列2所示的蛋白质进行如下点突变得到的蛋白质：第395位氨基酸残基由I突变为M，第479位氨基酸残基由V突变为F；

（a9）将序列表中序列2所示的蛋白质进行如下点突变得到的蛋白质：第306位氨基酸残基由S突变为E，第395位氨基酸残基由I突变为M。

2.编码权利要求1所述的蛋白质的基因。

3.含有权利要求2所述基因的重组表达载体、表达盒或重组菌。

4.权利要求1中（a2）、（a3）、（a9）、（a5）、（a7）、（a1）或（a6）所述的蛋白质或其编码基因在以次丹参酮二烯为底物催化生成铁锈醇中的应用。

5.权利要求1中（a1）、（a5）、（a7）、（a6）、（a8）、（a2）或（a4）所述的蛋白质或其编码基因在以次丹参酮二烯为底物催化生成柳杉酚中的应用。

6.权利要求1中（a1）或（a4）所述的蛋白质或其编码基因在以次丹参酮二烯为底物催化生成11-羟基铁锈醇中的应用。

7.权利要求1中（a1）或（a4）所述的蛋白质或其编码基因以次丹参酮二烯为底物催化生成11-羟基柳杉酚中的应用。

8.制备铁锈醇的方法，包括如下步骤：以次丹参酮二烯为底物，采用权利要求1中（a2）、（a3）、（a9）、（a5）、（a7）、（a1）或（a6）所述的蛋白质进行催化反应，得到铁锈醇。

9.制备柳杉酚的方法，包括如下步骤：以次丹参酮二烯为底物，采用权利要求1中（a1）、（a5）、（a7）、（a6）、（a8）、（a2）或（a4）所述的蛋白质进行催化反应，得到柳杉酚。

10.制备11-羟基铁锈醇的方法，包括如下步骤：以次丹参酮二烯为底物，采用权利要求1中（a1）或（a4）所述的蛋白质进行催化反应，得到11-羟基铁锈醇。

11.制备11-羟基柳杉酚的方法，包括如下步骤：以次丹参酮二烯为底物，采用权利要求1中（a1）或（a4）所述的蛋白质进行催化反应，得到11-羟基柳杉酚。