[发明专利]快速鉴别罗氏沼虾性别的方法有效
| 申请号： | 202010042059.2 | 申请日： | 2020-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN111118130B | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 刘云;杨玲玲 | 申请（专利权）人： | 深圳市泽龙生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6879 | 分类号： | C12Q1/6879 |
| 代理公司： | 深圳壹舟知识产权代理事务所(普通合伙) 44331 | 代理人： | 寇闯 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市龙华区龙华*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 鉴别 罗氏沼虾 性别 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种快速鉴别罗氏沼虾三种基因型的方法，所述三种基因型为ZZ、ZW和WW，所述方法包括以下步骤：
S1：从罗氏沼虾组织中提取罗氏沼虾基因组DNA；
S2：利用SEQID NO: 3和SEQ ID NO: 4作为引物进行PCR扩增，其中兼并碱基Y代表该位点碱基为C或T，兼并碱基N代表该位点碱基为A或T；
S3：将S2扩增后得到的产物进行电泳分离，根据带型判定所检测罗氏沼虾的遗传性别，其中ZZ基因型扩增条带为259 bp单一条带；ZW扩增为259 bp和134 bp两条条带；而超雌罗氏沼虾WW基因型扩增为134 bp的单一条带。
2.根据权利要求1中任一项所述的方法，其特征在于：采用罗氏沼虾触须或触角组织来提取基因组DNA。
3.根据权利要求1中任一项所述的方法，其特征在于：基因组DNA模版量为50 ng ± 5ng, PCR引物浓度为10 μm± 1 μm, 引物退火温度为50℃± 2℃，扩增循环数为39 ± 3。
4.根据权利要求1中任一项所述的方法，其特征在于：电泳中使用的凝胶的浓度为1.5%± 0.2 %，凝胶电泳时间为20分钟±3分钟。
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