[发明专利]一种用于锚定小麦4D染色体的特异性探针和锚定方法有效
| 申请号： | 202010045850.9 | 申请日： | 2020-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN111118002B | 公开（公告）日： | 2022-11-15 |
| 发明（设计）人： | 张洁;郎涛;蒋云;郭元林;王颖;宣朴 | 申请（专利权）人： | 四川省农业科学院生物技术核技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/6841 |
| 代理公司： | 成都正德明志知识产权代理有限公司 51360 | 代理人： | 陈瑶 |
| 地址： | 610061 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 锚定 小麦 染色体 特异性 探针 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种核酸探针在锚定小麦4D染色体中的应用，所述核酸探针包括如SEQ ID NO：1所示的寡核苷酸序列以及与寡核苷酸的5'端连接的荧光基团；所述核酸探针只在小麦4D染色体短臂端部特异杂交。
2.采用权利要求1所述的核酸探针对小麦4D染色体进行快速锚定的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）对待测样品进行处理，并制片；
（2）将上述核酸探针与处理后的待测样品进行荧光原位杂交，然后镜检。
3.根据权利要求2所述的锚定方法，其特征在于，步骤（1）具体步骤为：取小麦根尖，将其制备成小麦根尖细胞悬浮液，然后进行制片。
4.根据权利要求2所述的锚定方法，其特征在于，步骤（2）具体过程为：将权利要求1所述的核酸探针用杂交缓冲液稀释，使其浓度为1nmol/100uL，得工作液，然后将工作液和杂交缓冲液按体积比为1:3-5混合，得杂交液，将杂交液滴于处理后的待测样品上，进行荧光原位杂交，然后镜检。
5.根据权利要求4所述的锚定方法，其特征在于，工作液和杂交缓冲液的体积比为1:4。
6.根据权利要求4或5所述的锚定方法，其特征在于，杂交缓冲液为2×SSC和1×TE按体积比为1:1混合的混合液。
7.根据权利要求2所述的锚定方法，其特征在于，杂交条件为37℃，黑暗条件下杂交3h。
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