[发明专利]载生物活性因子PLA/PLGA/CS复合膜及其制备方法

说明书

本发明公开了一种载生物活性因子PLA/PLGA/CS复合膜及其制备方法。本发明利用静电纺丝和静电喷雾相结合的方式，以PLA膜作为密封层，利用PLA膜的致密性防止药物扩散并提供力学支撑；PLGA微球作为夹心层，负载药物；利用CS膜较大的孔隙率和较高的生物相容性作为调控缓释层，直接接触损伤区域，同时可以种植种子细胞以达到神经修复的目的，制得膜/球/膜三层结构的PLA/PLGA/CS复合膜。本发明的复合膜结构稳定且具有一定的力学强度，拉伸强度为2.83±0.31Mpa，断裂伸长率为53.25±0.18％；可以良好的负载药物并具有很好的药物缓释效果，释放药物长达两个月以上，满足脊髓损伤修复所需要的时间；同时具有无细胞毒性，成功诱导PC‑12细胞5天内分化为神经元，有助于神经修复。

技术领域

本发明属于应用于脊髓损伤治疗的生物复合膜技术领域，涉及一种载生物活性因子PLA/PLGA/CS复合膜及其制备方法。

背景技术

脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)是由于各种原因引起的椎管内脊髓或马尾神经不同程度的损伤。组织工程技术是目前治疗脊髓损伤最有前景的方法，通过选择具有良好的生物相容性、降解性、机械性能以及低神经毒性的生物材料，构建三维支架并负载促神经元生长或保护神经元的药物，为损伤脊髓的再生提供良好的微环境以达到脊髓修复的理想效果。中国专利申请CN102671238A公开了一种包括I型胶原蛋白、壳聚糖、明胶中的一种或多种原料制成的微孔支架，该支架具有内部孔径大小均匀、微管轴向平行排列高度仿真、邻近微管孔隙广泛沟通等结构优点。中国专利申请CN104399131A公开了一种以复合型红景天苷缓释微球与I型胶原蛋白为原料制备的多孔径柱状神经导管，该导管可以引导神经纤维定向生长，具有良好的降解性和生物相容性。文献1(Yuzhu He,Yahui Jin,XiumeiWang,et al.An Antimicrobial Peptide-Loaded Gelatin/Chitosan NanofibrousMembrane Fabricated by Sequential Layer-by-Layer Electrospinning andElectrospraying Techniques.Nanomaterials.2018,8,3)利用壳聚糖明胶制备纤维膜和PLGA微球负载Pac-525，制得促进骨成长的复合膜，该复合膜可成功引导骨再生药物释放时间约为30天。

上述支架均是将生物材料制成导管或块状引导神经生长，虽然具有较好的生物相容性，但却难以应用于临床。因为此类支架需对脊髓半侧切除后植入，由于临床病人的脊髓损伤范围不规则，多呈不完全性，难以应用，更不可能切除一段安置导管。而多数载药复合膜药物释放时间短，无法满足脊髓修复所需时间，其药物释放方向和速率也难以控制。因此选择合适的生物材料设计一种可方便应用于脊髓损伤临床治疗并能长时间稳定释放药物的支架材料具有重要的实践应用价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种载生物活性因子聚乳酸/聚乳酸-羟基乙酸共聚物/壳聚糖(PLA/PLGA/CS)复合膜及其制备方法。本发明利用静电纺丝和静电喷雾相结合的方式，制备一种膜/球/膜的三层结构。以PLA膜作为密封层，利用PLA膜的致密性防止药物扩散并提供一定的力学支撑；PLGA微球作为夹心层，负载药物；利用CS膜较大的孔隙率和较高的生物相容性作为调控缓释层，直接接触损伤区域，同时可以种植种子细胞以达到神经修复的目的。

实现本发明目的的技术方案如下：

载生物活性因子PLA/PLGA/CS复合膜的制备方法，具体步骤如下：

(1)将聚乳酸(PLA)溶于六氟异丙醇中配成7～8wt％的PLA溶液；

(2)将聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)溶于氯仿中得到6～7wt％的PLGA有机相溶液，将药物溶于水中制备水相溶液，然后，将水相溶液和PLGA有机相溶液混合，超声处理得到水油比为1:100～1:200的乳液；